Dissertação
Evidências da proteína da heterocromatina 1 (HP1) no ciclo de vida e sua interação com proteínas nucleares em cercarias de Schistosoma mansoni Schistosoma mansoni
Evidences for Heterochromatin protein 1 (HP1) in life cycle and candidates for interaction with nuclear proteins in Schistosoma mansoni cercariae
Registro en:
Autor
Trindade, Natália Silva da
Institución
Resumen
Schistosomiasis is a disease caused by parasites of the genus Schistosoma. It is
estimated that 240 million people worldwide are infected with the parasite and about
700 million people are at risk of infection. As post-translational modifications of the
stories are epigenetic mechanisms, associated with muted or active chromatin states,
regulating genetic expression at the transcriptional level. Although they are as important
as the post-translational modifications of the stories, studies have shown that coregulators
of transcription are also important for the application of the parasite's genetic
expression. Heterochromatin Protein 1 (HP1) is a known co-regulator conserved in
evolution and its importance has already been detected in mammals, yeasts and
protozoa, but so far in Schistosoma mansoni that has not yet been used. In this work,
SmHP1 was not identified in the parasite's database and its primary amino acid structure
is conserved evolutionarily. An expression of the SmHP1 mRNA was analyzed during
the life cycle and a greater enclosed expression was evidenced when compared to other
phases, however, an expression of the protein is not altered in all tested steps. In
addition, a Western blotting analysis showed that, in the parasite's life cycle, SmHP1
can form 56kDa dimers in solution. An immunoprecipitation using the anti-HP1
antibody followed by mass spectrometry has shown that several tests of transcription of
substances activated by SmHP1 are not being performed, but the maintenance roles of
transcription repressants are not yet elucidated. FAPESP - Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de São Paulo Dissertação (Mestrado) A esquistossomose é uma doença causada por parasitas do gênero Schistosoma. Estimase
que 240 milhões de pessoas no mundo estejam infectadas pelo parasita e cerca de 700
milhões de pessoas estejam em risco de infecção. As modificações pós-traducionais das
histonas são mecanismos epigenéticos, associados a estados silenciados ou ativos da
cromatina, regulando a expressão gênica no nível transcricional. Embora sejam
importantes as modificações pós-traducionais das histonas, estudos demonstraram que
os co-reguladores da transcrição também são importantes para a regulação da expressão
gênica do parasito. A Proteina da Heterocromatina 1 (HP1) é um conhecido coregulador
conservado na evolução e sua importância já foi descrita em mamíferos,
leveduras e protozoários, mas até o momento em Schistosoma mansoni essa proteína
ainda não foi descrita. Neste trabalho, SmHP1 foi identificada no banco de dados do
parasito e sua estrutura primária de aminoácidos é conservada evolutivamente. A
expressão do mRNA do SmHP1 foi analisada durante o ciclo de vida, e foi evidenciada
uma maior expressão na cercária quando comparada com outras fases, no entanto, a
expressão da proteína não é alterada em todas as etapas testadas. Além disso, a análise
por Western blotting mostrou que, no ciclo de vida do parasita a SmHP1 pode formar
dímeros de 56kDa em solução. A imunoprecipitação usando o anticorpo anti-HP1
seguido por espectrometria de massas mostrou que vários alvos proteicos envolvidos na
regulação da transcrição podem interagir com a SmHP1 no estágio das cercárias, mas os
papeis na manutenção dos estados repressivos da transcrição ainda não estão elucidados. 2022-01-27