Dissertação
Avaliação do Potencial citotóxico e genotóxico do Fe (II) E FeSO4 em cultura de células mononucleares de sangue periférico humano: riscos versos segurança em suplementação prolongada
Evaluation of the cytotoxic and genotoxic potential of Fe (II) and FeSO4 in culture of human peripheral blood mononuclear cells: risks versus safety in prolonged supplementation
Registro en:
ROSA, Emanoeli da. Avaliação do Potencial citotóxico e genotóxico do Fe (II) E FeSO4 em cultura de células mononucleares de sangue periférico humano: riscos versos segurança em suplementação prolongada. 60 p. Dissertação (Mestrado em Ciências Farmacêuticas) - Universidade Federal do Pampa, Uruguaiana, 2018.
Autor
Rosa, Emanoeli da
Institución
Resumen
Iron (Fe) is an indispensable trace element for human body homeostasis, and its
plasma decrease competes for the establishment of relevant clinical conditions. The
pharmacological therapy and feed enrichment conducts use iron-based salts to treat
and prevent sideropenia. However, if not properly monitored, these conducts can
generate hyperferremia conditions. Nevertheless, the literature exhaustively describes
the induction of tissue damage caused by the excess of iron basing it with the increase
of oxidative stress. Nonetheless, very little is known about the relationship between Fe
concentrations and damages to the human genetic material. The objective of this study
was to compare the cytotoxic, genotoxic and mutagenic effects of Fe (II) and FeSO4
in human peripheral blood mononuclear cells culture at 1, 2, 5 and 10 μg / mL
concentrations, through cell viability analysis, cell proliferation, comet and
micronucleus assay, as well as to indicate the concentration where the onset of lesions
was observed. Both the Fe (II) and FeSO4 showed no cytotoxicity. On the other hand,
the comet assay demonstrated that Fe (II) induced an increase in DNA damage of
approximately 30-times to that observed for the negative control; while FeSO4
generated an even greater damage, around 60 times (p <0.001). In the micronucleus
test, Fe (II) increased in the micronuclei frequency from 2.5 to 6 times the rate
encountered for the negative control; while the increasing in the micronuclei frequency
by FeSO4 ranged from 6 to 12 times (p<0.05). It can be noted that, for these last two
trials, the lesions initiated at 1 μg / mL concentration, in other words, really close to the
plasmatic peak (approximately 1,33 μg/mL) to a habitual therapeutic dose of FeSO4
(40 mg / day). These findings draw attention to the adequate clinical monitoring of
people who require Fe-based supplementation, in detriment of injuries to their genetic
material. It is suggested complementary studies to elucidate the mechanisms involved
in the phenomena observed and evaluations with other cell types and in vivo assays
(trials) to confirm the intensity of the lesions. O ferro (Fe) é um elemento-traço indispensável para a homeostase corporal em
humanos e sua diminuição plasmática concorre para instalação de quadros clínicos
relevantes. A terapia farmacológica e as condutas de enriquecimento alimentar
utilizam sais à base de ferro para tratar e prevenir a sideropenia. Entretanto, se não
acompanhadas adequadamente, essas condutas podem gerar quadros de
hiperferremia. Não obstante, a literatura descreve exaustivamente a indução de danos
teciduais provocados pelo excesso de ferro fundamentando-a com o aumento de
estresse oxidativo. Entretanto, muito pouco se sabe sobre a relação entre
concentrações de Fe e danos ao material genético humano. O objetivo deste estudo
foi comparar os efeitos citotóxicos, genotóxicos e mutagênicos do Fe (II) e do FeSO4
em cultura de células mononucleares de sangue periférico humano nas concentrações
1, 2, 5 e 10 μg/mL, através da análise da viabilidade celular, proliferação celular,
ensaio cometa e ensaio de micronúcleos, bem como apontar a concentração onde se
observou o início das lesões. Tanto o Fe (II) quanto o FeSO4 não apresentaram
citotoxicidade. Por outro lado, o ensaio cometa demonstrou que o Fe (II) induziu um
aumento de dano de DNA de aproximadamente 30 vezes ao observado para o
controle negativo; enquanto o FeSO4 gerou um dano ainda maior, por volta de 60
vezes (p<0,001). No teste de micronúcleo, o Fe (II) aumentou na frequência de
micronúcleos de 2,5 a 6 vezes a taxa encontrada para o controle negativo; enquanto
o aumento da frequência de micronúcleos pelo FeSO4 variou de 6 a 12 vezes (p<0,05).
Observamos que, para esses últimos dois ensaios, as lesões iniciaram na
concentração de 1 μg/mL, ou seja, muito próxima ao pico plasmático
(aproximadamente 1,33 μg/mL) para uma dose terapêutica habitual de FeSO4 (40
mg/dia). Esses achados chamam atenção para o acompanhamento clínico adequado
de pessoas que necessitem de suplementação à base de Fe, em detrimento de lesões
ao seu material genético. Sugerimos estudos complementares para elucidação dos
mecanismos envolvidos nos fenômenos que observamos e avaliações com outros
tipos celulares e ensaios in vivo para confirmar a intensidade das lesões.