Dissertação
Efeitos transformantes do bisfenol-A e medroxiprogesterona em células epiteliais da mama
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Autor
Peres, Lívia de Paula
Institución
Resumen
Bisphenol-A (BPA) and medroxyprogesterone acetate (MPA) are disruptor s hormone and
hormone responsible for changes in proliferation, apoptosis, cell migration and invasion that
contribute to the development and progression of breast cancer. Breast epithelial cells, MCF-
10A, were treated with BPA 1 μM or 10 μM for 12 days. On the 12th day it was associated
with MPA for 96 hours and cell cultures analyzed by flow cytometry to verify the presence of
base to breast cancer proteins. To assess invasiveness of cells treated with BPA and MPA was
performed in Transwell invasion assay with Matrigel® and SDF-1α/CXCL12. Polymerase
Chain Reaction (PCR) was performed and expression of some genes related to epithelial
mesenchymal transition proven. BPA 10 μM/MPA induced the expression of CXCR4 and other
factors related to invasion as metalloproteinases 2 and 9 (MMPs). The treated cells showed
increased invasiveness in the presence of SDF-1α ligand for CXCR4. However, there are small
changes in growth factor receptors such as EGFR1 decreased and increased HER2. Increased
migration and invasion raise suspicion loss of epithelial characteristics of MCF-10A. Therefore,
we investigated whether the expression of the epithelial marker E-cadherin and it was observed
that treatment with BPA 10 μM/MPA had the greatest reduction in the expression of adhesion
molecule. BPA/MPA had the ability to alter MCF-10A in vitro, conferring tumor properties,
such as increased expression of proteins involved in metastasis, increased migration capacity,
down-regulation of CDH1 (epithelial marker gene), increased expression CDH2 the gene
considered mesenchymal marker and degradation of extracellular matrix by the expression of
MMP-2 and MMP-9. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior Mestre em Imunologia e Parasitologia Aplicadas Bisfenol-A (BPA) e medroxiprogesterona (MPA) são disruptores hormonais e hormônios
responsáveis por alterações na proliferação, apoptose, migração e invasão celular que
contribuem para o desenvolvimento e progressão do câncer de mama. Células epiteliais da
mama, MCF-10A, foram tratadas com BPA 1 μM ou 10 μM durante 12 dias. No 12° dia foi
associado MPA durante 96 horas e as culturas de células analisadas por citometria de fluxo para
verificar a presença de proteínas comuns ao câncer de mama. Para avaliar a capacidade de
invasão das células tratadas com BPA e MPA foi realizado ensaio de invasão em Transwell
com Matrigel® e SDF-1α/CXCL12. Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) foi realizada e a
expressão de alguns genes relacionados a transição epitélio mesênquima comprovadas. BPA 10
μM/MPA induziu a expressão de CXCR4 e de outros fatores relacionados com a invasão como
as metaloproteinases 2 e 9 (MMPs). As células tratadas mostraram maior capacidade de invasão
na presença do ligante SDF-1α para o receptor CXCR4. No entanto, observou-se pequenas
alterações dos receptores dos fatores de crescimento, como a diminuição de EGFR1 e aumento
de HER2. O aumento da migração e invasão levanta a suspeita de perda das características
epiteliais das MCF-10A. Sendo assim, investigou-se a expressão do marcador epitelial Ecaderina
e observou-se que o tratamento com BPA 10μM/MPA teve a maior redução da
expressão dessa molécula de adesão. BPA/MPA tiveram a capacidade de alterar as MCF-10A,
in vitro, conferindo propriedades tumorais, tais como: aumento da expressão de proteínas
envolvidas em metástases, aumento da capacidade de migração, diminuição da regulação do
gene CDH1 marcador epitelial, aumento da expressão do gene CDH2 considerado marcador
mesenquimal e degradação da matriz extracelular pela expressão das MMP-2 e MMP-9.