Brasil
| Dissertação
Pesquisa da ação tripanomicida da própolis: estudos "in vitro" e "in vivo"
Research on the trypanomicidal action of propolis: "in vitro" and "in vivo" studies
Registro en:
Autor
Moroni, Fábio Tonissi
Institución
Resumen
Chagas disease is one of the most important parasitic diseases in Latin America,
due to its high incidence, prevalence and socioeconomic repercussions that this
endemic cause to countries. Despite efforts, a very small number of drugs have
been indicated for the specific treatment of the disease, all with side effects, efficacy
on some strains and action restricted to the acute phase of the disease. Studies carried out “in vitro”
demonstrated that preparations with propolis, obtained in bee hives, have high
activity against T. cruzi, inhibiting proliferation within the host cell. The gift
The work consists of characterizing the best solvent, period of treatment and pre-treatment, extract dose to reduce parasitemia and the survival time “in vivo” in Swiss mice infected with 5 x 10 ^ 4 infective forms of strain Y of T. I crossed. Crude propolis of Apis mellifera (100 g), collected in the Patrocínio region - MG, was immersed in 500 ml of deionized water, crushed and heated to 80 ° C for 120 minutes, filtered, lyophilized and resuspended in desired concentrations, obtaining desired concentrations. the aqueous extract of propolis (EAP). The tweenolic propolis extract (ETP) was obtained by immersing propolis from Apis mellifera in 500 ml of Tween 80 (5%) in deionized water and following the same preparation as the EAP. The propolis ethanol extract (EEP) was obtained by dissolving 100 g of crude propolis in 500 ml of 80% (v / v) ethanol, heated to 80ºC for 120 minutes, crushed, filtered and evaporated in a hot plate at 75ºC . The residue
dry was resuspended in 80% (v / v) ethanol in desired concentrations. The EAP
proved to be better than ETP in both “in vitro” and “in vivo” trials.The EEP
presented interference in the “in vitro” tests due to the influence of ethanol. The WBS was
administered in increasing doses, intraperitoneally, up to 1849.6 mg / kg and orally, up to
1230.7 mg / kg, in mice infected with T.cruzi, which showed a reduction in
parasitemia and increased survival time. The best oral doses and
intraperitoneal were 153.8 mg / kg and 924.8 mg / kg, respectively, with a percentage of
reduction of parasitemia by 81.9% and 68.6%. The previous treatment of animals with WBS, in
dose of 153.8 mg / kg (orally) and 924.8 mg / kg (intraperitoneal), proved to be efficient
when performed 24 hours (orally) and 72 hours (i.p.) before infection with T.cruzi. THE
treatment period, “in vivo”, most effective was 5 days for both routes of
administration. To investigate the possible involvement of the nitric oxide system in
mechanism of action of EAP, NOSi inhibitors (L — NAME and NOARG) were tested “in
in vitro ", demonstrating that the EAP has a trypanomicidal action even in the presence of
inhibitors, indicating a mechanism independent of NO. The results obtained in this
work suggest that the aqueous propolis extract has a component (s) capable of
act on the parasitemia of mice infected with T.cruzi, reducing
significantly, the number of parasites during infection, by a mechanism of action
dose dependent. Dissertação (Mestrado) A doença de Chagas é uma das mais importantes doenças parasitárias da América Latina,
em virtude de sua alta incidência, prevalência e repercussão sócioeconômica que esta
endemia causa aos países. Apesar dos esforços, um número muito reduzido de drogas tem
sido indicados para o tratamento específico da doença, todas com efeitos colaterais, eficácia
sobre algumas cepas e ação restrita à fase aguda da doença. Estudos realizados “in vitro”
demostraram que preparações com a própolis, obtida em colméias de abelhas, possuem alta
atividade contra o T. cruzi, inibindo a proliferação dentro da célula hospedeira. O presente
trabalho consiste em caracterizar o melhor solvente, período de tratamento e pré- tratamento, dose de extrato para redução da parasitemia e o tempo de sobrevivência “in vivo” em camundongos Swiss infectados com 5 x 10^4 formas infectantes da cepa Y do T. cruzi. Própolis bruta de Apis mellifera (100 g), coletada na região de Patrocínio - MG, foi imersa em 500 ml de água desionizada, triturada e aquecida a 80°C durante 120 minutos, filtrada , liofilizada e ressuspendida em concentrações desejadas, obtendo-se o extrato aquoso de própolis (EAP). O extrato tweenólico de própolis (ETP) foi obtido pela imersão de própolis de Apis mellifera em 500 ml de Tween 80 (5%) em água deionizada e seguindo a mesma forma de preparo que o EAP. O extrato etanólico de própolis (EEP) foi obtido através da dissolução de 100 g da propólis bruta em 500 ml de etanol a 80% (v/v), aquecida a 80ºC por 120 minutos, triturada, filtrada e evaporada em chapa quente a 75ºC. O resíduo
seco foi ressuspendido em etanol 80% (v/v) em concentrações desejadas. O EAP
demonstrou ser melhor que ETP tanto nos ensaios “in vitro” como “in vivo”. O EEP
apresentou interferência nos ensaios “in vitro” devido à influência do etanol. O EAP foi
administrado em doses crescentes, via intraperitonial, até 1849,6 mg/kg e via oral, até
1230,7 mg/kg, em camundongos infectados com T.cruzi , os quais apresentaram redução da
parasitemia e aumento do tempo de sobrevivência. As melhores doses via oral e
intraperitonial foram, respectivamente, de 153,8 mg/kg e 924,8 mg/kg, com porcentagem de
redução da parasitemia em 81,9% e 68,6%. O tratamento prévio dos animais com EAP, na
dose de 153,8 mg/kg (via oral) e 924,8 mg/kg (via intraperitonial), mostrou—se eficiente
quando realizado 24 horas (via oral) e 72 horas(via i.p.) antes da infecção com T.cruzi. O
período de tratamento, “in vivo”, mais eficaz foi de 5 dias para as duas vias de
administração. Para investigar o possível envolvimento do sistema óxido nítrico no
mecanismo de ação do EAP, inibidores da NOSi (L—NAME e NOARG) foram testados “in
vitro”, demonstrando que o EAP possui ação tripanomicida mesmo na presença dos
inibidores, indicando um mecanismo independente de NO. Os resultados obtidos nesse
trabalho sugerem que o extrato aquoso de própolis possui componente(s) capaz (es) de
atuar sobre a parasitemia de camundongos infectados com T.cruzi, reduzindo
significativamente, o número de parasitas durante a infecção, por um mecanismo de ação
dependente da dose.