Brasil
| Dissertação
A infecção por Trypanosoma cruzi e a forma recombinante da sua proteína P21 altera a migração de células de câncer de mama triplo-negativo e de células não tumorais
Infection with Trypanosoma cruzi and the recombinant form of its P21 protein alters the migration of triple-negative breast cancer cells and non-tumor cells
Registro en:
Autor
Silveira, Anna Clara Azevedo
Institución
Resumen
Several studies have shown that extracts, proteins and Trypanosoma cruzi itself have an
action in reducing tumors in animal models and in cell cultures. The recombinant protein
P21 from T. cruzi performs different biological activities such as chemotactic activity for
immune system cells, inhibits angiogenesis and negatively modulates the replication of the
parasite. Furthermore, it was observed that this protein binds to the CXCR4 chemokine
receptor. Thus, this study aimed to evaluate the impact of rP21 and T. cruzi infection on
triple-negative breast cancer cells and non-tumor epithelial cells. Initially, we performed
the viability test and it was seen that the treatment with rP21 and the infection by T. cruzi
up to 72 hours, did not present a viability lower than 50%. After the viability test, we
verified the rate of invasion, multiplication and hatching of the parasite in the supernatant.
The normal breast cell line, MCF-10A, is susceptible to infection by T. cruzi, being able to
provide a favorable environment for the replication and differentiation of the parasite and
the release of viable infective forms. The triple-negative MDA-MB-231 breast cell is also
susceptible to parasite infection. After treatment with rP21 and T. cruzi infection, a
decrease in migration of both treated groups was noted. After treatment with rP21 and
infection by T. cruzi, a decrease in migration of both treated groups was noted.
Furthermore, we observed that the rP21 protein after 3 hours labeling is located in the cell
nucleus, which may be related to the CXCR4 receptor. Our results show that the
expression of CXCR4 in the MDA-MB-231 cell decreases over time, but it presents a
growth curve and a decrease in fluorescence at the observed times, suggesting a
translocation of the CXCR4 receptor over time. In MCF-10A cells, fluorescence over time
did not show any significant difference. When we observed the interaction of T. cruzi
infection with the CXCR4 receptor, we saw that there is an interaction between them in
MDA-MB-231 and MCF-10A cells, suggesting a relationship between migration/invasion
and proliferation of these cells. In conclusion, rP21 and other T. cruzi molecules may be
potential targets for the discovery anti-tumor drugs. CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico Dissertação (Mestrado) Vários estudos têm demonstrado que extratos, proteínas e o próprio Trypanossoma cruzi
tem ação na redução de tumores em modelos animais e em cultura de células. A proteína
recombinante P21 de T. cruzi desempenha diferentes atividades biológicas como atividade
quimiotática para células do sistema imunológico, inibe a angiogênese e modula
negativamente a replicação do parasito. Além disso foi observado que esta proteína se liga
ao receptor de quimiocina CXCR4. Assim esse estudo teve como objetivo avaliar o
impacto da rP21 e da infecção por T. cruzi em células de câncer de mama triplo-negativo e
células epiteliais não tumorais. Inicialmente realizamos o ensaio de viabilidade e foi visto
que o tratamento com rP21 e a infecção por T. cruzi até o tempo de 72 horas, não
apresentou uma viabilidade menor que 50%. Após o ensaio de viabilidade verificamos a
taxa de invasão, multiplicação e eclosão de parasita no sobrenadante. A linhagem celular
de mama normal, MCF-10A é suscetível à infecção por T. cruzi, sendo capaz de fornecer
um ambiente propício para a replicação e diferenciação do parasita e a liberação de formas
infectantes viáveis. A célula de mama triplo-negativo MDA-MB-231 também apresenta
uma suscetibilidade a infecção pelo parasita. Após o tratamento com rP21 e a infecção por
T. cruzi, notou-se a diminuição na migração de ambos os grupos tratados. Além disso
observamos que a proteína rP21 após a marcação no tempo de 3 horas encontra-se
localizada no núcleo da célula o que pode estar relacionada com o receptor CXCR4.
Nossos resultados mostram que a expressão de CXCR4 na célula MDA-MB-231 diminui
ao longo do tempo, porém apresenta uma curva de crescimento e queda na fluorescência
nos tempos observados sugerindo uma translocação do receptor CXCR4 ao longo do
tempo. Nas células MCF-10A a fluorescência ao longo dos tempos não apresentou
diferença significativa. Quando observamos a interação da infecção do T. cruzi com o
receptor CXCR4 vimos que ocorre uma interação entre eles nas células MDA-MB-231 e
MCF-10A sugerindo uma relação entre a migração/invasão e proliferação dessas células.
Em conclusão rP21 e outras moléculas do T. cruzi podem ser alvos potenciais para a
descoberta para drogas contra o tumor.
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