Many plants live in symbiosis with microorganisms that can live on their surface (epiphytic) or interior (endophytic). Many of these microorganisms produce secondary metabolites that can protect the plant or induce some host defense response. Moreover, the microorganisms that produce such substances have been explored as biocontrol agents against insects, weeds, plant pathogenic fungi and pathogenic bacteria. Thus, the aim of our study was to isolate endophytic fungi Eremanthus sp. and check if they have antagonistic activity against fungal pathogens of plants and pathogenic bacteria. The endophytic fungi were isolated from three areas of the Serra da Bocaina in Minas Gerais, in three different conditions; with human interaction (Area 1), in their natural habitat (Area 2) and in planned planting (Area 3). The endophytic fungi found were identified by sequencing of the ITS region and subjected an in vitro antagonism test. The antagonisms that show antibiosis were submitted to tests on split plates to verify the volatile compound production. In the test against bacteria, filtrates of each endophytic fungus were separated and applied in the disk diffusion method. Endophytic fungus filtrate showed no inhibitory action against bacteria. In the pairing of endophytic fungi against the pathogens used fungi of the gerera Cryptosporiopsis, Diaporthe, Xylaria, Paraconiothirium and Camarosporium presented antibiosis by releasing compounds in the medium. This paper is the first report on the isolation of twelve genera in Eremanthus sp. besides verifying their antagonist capacity such fungi, which opens the way for the discovery of the substances produced by the endophytic fungi that inhibit pathogens.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)Grande parte dos vegetais vive em simbiose com microrganismos que podem viver em sua superfície (epifíticos) ou em seu interior (endofíticos). Muitos destes microrganismos produzem compostos secundários que podem proteger o hospedeiro ou induzir alguma resposta de defesa da planta. Os microrganismos produtores de tais substâncias são explorados como agentes de biocontrole contra insetos, ervas daninhas, fungos fitopatogênicos e bactérias patogênicas. Dessa forma, o objetivo neste trabalho foi isolar e identificar fungos endofíticos de Eremanthus sp. e verificar se eles apresentam atividade antagonista contra fungos fitopatogênicos e bactérias patogênicas. Foram isolados fungos endofíticos de três áreas da Serra da Bocaina em Minas Gerais, em três condições diferentes com interação humana (área 1), em seu habitat natural (área 2) e plantação planejada (área 3). Os fungos endofíticos encontrados foram identificados por meio do sequenciamento da região ITS e submetidos a testes de antagonismo in vitro. No teste contra bactérias, os filtrados de cada fungo endofítico foram separados e foi utilizada a metodologia de difusão em disco. Nenhum filtrado apresentou ação inibidora contra as bactérias. No pareamento dos fungos endofíticos contra os fitopatógenos utilizados fungos dos gêneros Cryptosporiopsis, Diaporthe, Xylaria, Paraconiothirium e Camarosporium apresentaram antibiose por difusão de substâncias no meio. Neste trabalho é relatado pela primeira vez o isolamento de doze gêneros de fungos filamentosos em Eremanthus sp. além de verificar a capacidade antagonista de tais fungos, o que abre caminho para a descoberta das substâncias produzidas pelos fungos endofíticos que possam ser utilizados no controle desses patógenos.