Artículo de revista
Sexual Determination and Differentiation During Embryonic and Fetal Development of New Zealand Rabbit Females
Determinación y diferenciación sexual durante el desarrollo embrionario y fetal de hembras de conejo de Nueva Zelanda
Registro en:
0717-9502
0717-9367
10.4067/S0717-95022018000200677
GN2GB
WOS:000438815300048
Autor
Mario, Lara Carolina
Borghesi, Jessica
de Almeida da Anunciacao, Adriana Raquel
de Carvalho Figueiredo Miranda, Carla Maria
dos Santos, Amilton Cesar
Favaron, Phelipe Oliveira
dos Santos, Daniela Martins
Conei, Daniel
Vasquez, Belgica
del Sol, Mariano
Miglino, Maria Angelica
Institución
Resumen
The aim of this study was to know the embryonic and fetal development of the female rabbit genital system (Oryctolagus cuniculus), describing its main phases and the moment of sexual differentiation. Eleven pregnant New Zealand female rabbits were used in different gestational phases. The day of coitus was determined as day 0. For each stage a minimum of two animals was considered. The samples were obtained every two days from the ninth day post-coitus (dpc) until the 28th dpc. The gestational period was divided in two: animals with undifferentiated sex (group 1) and animals with differentiated sex (group 2). The ages of embryos and fetuses were estimated through the crown-rump method. Subsequently, embryos and fetuses were dissected, fixed and processed to be embedded in paraffin (Histosec). The histological analysis was performed on sections stained with hematoxylin and eosin. Immunohistochemical analysis to determine sexual differentiation was performed on samples from the 16th, 18th and 28th dpc. Desert Hedgehog (Dhh) and Indian Hedgehog (Ihh) primary antibodies, respectively, were used to identify cells of the male and female germinal epithelium. The immunohistochemical results showed that at the 16th dpc, female sexual differentiation was evident, since positive expression of the Ihh protein was observed. Sexual differentiation was obtained through histological analysis on the 18th dpc and through anatomical observation of the external genitalia on the 24th dpc. Knowing the characteristics of the embryonic and fetal development of the female rabbit genital system as well as the moment of sexual differentiation make it possible to establish bases for future research that address the physiology and pathology of these organs. Thus, any alteration in the chain of events of sexual determination and differentiation must search for an explanation from the knowledge of the possible normal mechanisms affected. El objetivo de este estudio fue conocer el desarrollo embrionario y fetal del aparato genital de la hembra de conejo (Oryctolagus cuniculus), describiendo sus principales fases y el momento de la diferenciación sexual. Se utilizaron once conejas preñadas de Nueva Zelanda en diferentes fases gestacionales. El día del coito se determinó como día 0. Para cada etapa se consideró un mínimo de dos animales. Las muestras se obtuvieron cada dos días desde el noveno día poscoito (dpc) hasta el 28 dpc. El período gestacional se dividió en dos: animales con sexo indiferenciado (grupo 1) y animales con sexo diferenciado (grupo 2). Las edades de los embriones y fetos se estimaron mediante el método corona-rabadilla. Posteriormente, los embriones y fetos fueron disecados, fijados y procesados para ser embebidos en parafina (Histosec). El análisis histológico se realizó sobre secciones teñidas con hematoxilina y eosina. El análisis inmunohistoquímico para determinar la diferenciación sexual se realizó en muestras del 16, 18 y 28 dpc. Los anticuerpos primarios Desert Hedgehog (Dhh) e Indian Hedgehog (Ihh), respectivamente, se utilizaron para identificar células del epitelio germinal masculino y femenino. Los resultados inmunohistoquímicos mostraron que a los 16 dpc se evidenció la diferenciación sexual femenina, ya que se observó expresión positiva de la proteína Ihh. La diferenciación sexual se obtuvo mediante análisis histológico en el dpc 18 y mediante observación anatómica de los genitales externos en el dpc 24. El conocimiento de las características del desarrollo embrionario y fetal del aparato genital de la coneja, así como del momento de la diferenciación sexual, permite sentar las bases para futuras investigaciones que aborden la fisiología y patología de estos órganos. Así, cualquier alteración en la cadena de eventos de determinación y diferenciación sexual debe buscar una explicación a partir del conocimiento de los posibles mecanismos normales afectados.