Dissertation
Vigilância entomológica de arbovírus de importância médica em mosquitos dos gêneros aedes e culex
Registro en:
KROKOVSKY, Larissa. Vigilância entomológica de arbovírus de importância médica em mosquitos dos gêneros aedes e culex. 2019. 113 p. Dissertação, (mestrado)-Instituto Aggeu Magalhães, Fundação Oswaldo Cruz, Recife, 2019.
Autor
Krokovsky, Larissa
Resumen
Mosquitos do gênero Aedes são os principais vetores dos vírus Dengue (DENV), Zika (ZIKV) e Chikungunya (CHIKV). Além destes mosquitos, estudos demonstraram em condições de laboratório, a competência vetorial de Culex quinquefasciatus em transmitir ZIKV. A vigilância entomológica é uma ferramenta importante para o monitoramento de vetores, através de vários indicadores de presença de mosquitos, e pode também ser realizada a partir da detecção do agente patogênico em seu vetor. Diante do exposto, este trabalho avaliou a circulação de DENV, ZIKV e CHIKV em mosquitos dos gêneros Aedes e Culex coletados na Região Metropolitana de Recife (RMR) . Para isto, os mosquitos foram coletados no período de 2015 a 2017 por meio de aspiradores, separados em grupos (pools) por espécie, sexo e estado alimentar. Os pools de fêmeas foram submetidos à extração de RNA, RT-PCR e RT-qPCR. Adicionalmente, foi feito isolamento viral a partir das amostras positivas em culturas de células C6/36, seguido de sequenciamento de nova geração dessas amostras. No total, foram coletadas 6.227 fêmeas, das quais 51,75% foram da espécie A. aegypti (497 pools), 0,03% de A. albopictus (1 pool), 0,01% de A. taeniorhynchus (1 pool), 0,17% de A. scapularis (1 pool) e 48,04% de C. quinquefasciatus (549 pools). No total foram detectados 19 pools positivos para DENV (sorotipos 2 e 4), 194 para ZIKV e seis para CHIKV. Em relação à MIR para ZIKV, a taxa encontrada variou de 18,59 a 1.000, para DENV variou de 1,70 a 15,75 e para CHIKV a MIR encontrada foi de 2,75. Três amostras para DENV e uma para ZIKV apresentaram efeito citopático após inoculação em células C6/36. Um total de oito genomas de ZIKV foram sequenciados, com cobertura que variou de 24% a 100%. A investigação realizada permitiu acompanhar a dinâmica de infecção vetorial e demonstrou que mesmo após a epidemia, ainda foi possível detectar mosquitos positivos na RMR . Mosquitoes from Aedes genus are the main vectors of Dengue (DENV), Zika (ZIKV) and Chikungunya (CHIKV) viruses. In addition, studies have demonstrated in laboratory conditions, the vector competence of Culex quinquefasciatus in transmitting ZIKV. Entomological surveillance is an important tool for vector monitoring, witch use rates that indicate the presence of mosquitoes, and can also be performed through the detection of the pathogen in the vector. Given the above, this study analyzed the circulation of DENV, ZIKV and CHIKV in mosquitoes of the genera Aedes and Culex collected in the Metropolitan Region of Recife (MRR). For this, mosquitoes were collected from 2015 to 2017 by aspirators, separated into pools by species, sex and feed status. Pools were submitted to RNA extrtaction, RT-PCR and RT-qPCR. In addition, viral isolation was performed from positive samples in C6 / 36 cell cultures, followed by the next generation sequencing. In a total of 6,227 femeles were collected, of which 51.75% were A. aegypti (497 pools), 0.03% A. albopictus (1 pool), 0.01% A. taeniorhynchus (1 pool), 0.17% A. scapularis (1 pool) and 48.04% C. quinquefasciatus (549 pools). From these samples, 19 pools were positive for DENV (serotypes 2 and 4), 194 for ZIKV and six for CHIKV. Regarding MIR for ZIKV, the rate found ranged from 18.59 to 1,000, for DENV ranged from 1.70 to 15.75 and for CHIKV the MIR found was 2.75. Three samples of DENV and one ZIKV showed cytopathic effect after inoculation into C6 / 36 cells. A total of eight ZIKV genomes were sequenced, with coverage ranging from 24% to 100%. The investigation made it possible to monitor the vector infection and demonstrate that after the epidemic was also possible to detect positive mosquitoes in the MRR . 2023-01-30
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