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CRISPR / Cas-9 Vector System: Targets UL-39 and Inhibits HSV-1 Replication in Vitro
Registro en:
RAPOSO, Jéssica Vasques et al. CRISPR / Cas-9 Vector System: Targets UL-39 and Inhibits HSV-1 Replication in Vitro. Research Square, p. 1 - 10, Oct. 2021.
Autor
Raposo, Jéssica Vasques
Barros, Luciana Rodrigues Carvalho
Torres, Lauana Ribas
Pinto, Rafaela Barbosa da Silva
Lopes, Amanda de Oliveira
Souza, Elen Mello de
Bonamino, Martin Hernan
Paula, Vanessa Salete de
Resumen
Resumo em português - Google tradutor
O HSV-1 afeta aproximadamente 67% da população mundial. Aqui, buscamos utilizar o CRISPR/Cas9
sistema com o alvo UL39, essencial para a replicação do vírus. A sequência de sgRNA foi inserida em
plasmídeo (PX459-UL39). As células Vero foram transfectadas com PX459-UL39 e a inibição da replicação viral
foi avaliada 24 e 48 horas depois usando ensaios de placa e fluorescência e qPCR. Fluorescência
análises revelaram a presença de CRISPR/Cas9 anti-HSV-1 dentro das células Vero, e qPCR mostrou que o
a carga viral diminuiu em> 95% das células transfectadas com anti-HSV-1 CRISPR/Cas9. Nossos dados demonstram
a utilidade do PX459-UL39 para inibir a infecção por HSV-1. HSV-1 affects approximately 67% of the world population. Here, we sought to use the CRISPR / Cas9
system with the UL39 target, essential for virus replication. The sgRNA sequence was inserted into
plasmid (PX459-UL39). Vero cells were transfected with PX459-UL39, and inhibition of viral replication
was assessed 24 and 48 hours later using plaque assays and fluorescence and qPCR. Fluorescence
analyzes revealed the presence of anti-HSV-1 CRISPR/Cas9 within Vero cells, and qPCR showed that the
viral load decreased by> 95% of cells transfected with anti-HSV-1 CRISPR / Cas9. Our data demonstrate
the usefulness of the PX459-UL39 to inhibit HSV-1 infection.