La angiogénesis es la formación de vasos sanguíneos desde vasos preexistentes yjuega un papel importante en el desarrollo embrionario, la formación del cuerpo lúteo y endometrio, la regeneración de tejido y la cicatrización de heridas. También participa endistintas enfermedades como arterioesclerosis, diabetes, soriasis y crecimiento tumoral.Previamente se ha reportado que algunas proteínas involucradas en los sistemas decoagulación y fibrinólisis, como factor tisular, heparina y activador de plasminógeno tisular, regulan el proceso angiogénico. Una proteína esencial en la cascada de coagulación es elfactor de coagulación X (FX), una serina proteasa dependiente de vitamina K. Clásicamente, el zimógeno de FX se convierte proteolíticamente en FX activado (FXa), el cual cataliza lageneración de trombina en la superficie celular de las células vasculares. Más allá de su conocida función como factor de coagulación, está descrito que FXa señaliza a través de la activación de receptores activados por proteasas (P ARs), regulando la apoptosis, laremodelación de los tejidos, la fibrosis, el cáncer y la angiogénesis patológica. En relación a una posible participación del FXa en el proceso angiogénico, se ha demostrado que este factor no tiene un efecto directo sobre las células endoteliales murinas pero aumenta laangiogénesis a través de la liberación de VEGF desde los fibroblastos. Sin embargo, no se ha determinado el efecto directo del FX en su forma activa o inactiva sobre la angiogénesis en células endoteliales humanas y en modelos in vivo. En esta tesis se evaluó la participación de FX y FXa en modelos de angiogénesis tanto in vitro como in vivo. Los resultados obtenidos en este trabajo demostraron que FX y FXa inhiben significativamente la formación deestructuras tipo capilares inducida por VEGF en la línea celular EA.hy926, observándose el mismo efecto al utilizar cultivos primarios de células HUVECs. El efecto antiangiogénico de FX y FXa es concentración dependiente, teniendo un mayor efecto antiangiogénico FXa queFX a una misma concentración. Los resultados sugieren que la actividad antiangiogénica podría explicarse, en parte, por una disminución en la migración celular. El efectoantiangiogénico de FXa es dependiente de la señalización por P AR-1 no así, el de FX. El efecto antiangiogénico de FX es dependiente de su dominio Gla y, bajo nuestras condiciones experimentales, su efecto no se debería a una conversión a su forma activa. Junto con inhibirla formación de vasos sanguíneos, demostramos que FXa y aPAR-1 inducen la regresión de las estructuras tipo capilares ya formadas en matrigel. Interesantemente, esta acción no seobserva en presencia de FX. En modelos in vivo FX y FXa tienen un efecto antiangiogénico en el modelo de membrana corioalantoidea (CAM) de embrión de pollo y en el modelo de desarrollo de pez cebra. Al igual que en condiciones in vitro, aPAR-1 tiene un efectoantiangiogénico en el modelo de CAM similar a FXa, sugiriendo que este receptor también podría estar involucrado en el efecto antiangiogénico de FXa in vivo. De manera opuesta, FX y FXa promueven la angiogénesis en el modelo ovárico de rata. A pesar de no ser un modelo directo de angiogénesis, FXa aumenta el crecimiento tumoral en modelo de xenograft de cáncer endometrial humano.En resumen, demostramos por primera vez una función antiangiogénica para estaproteasa relacionada con coagulación, no solo para su forma activa sino quesorprendentemente para su forma inactiva (zimógeno ). Una profundización en el estudio de los diferentes efectos observados in vitro e in vivo de esta proteasa puede, en el futuro,entregar una mayor comprensión de la regulación de la angiogénesis en condiciones fisiológicas y dar lugar a una nueva clase de fármacos antiangiogénicos.PFCHA-BecasDoctor en Ciencias Biológicas Mención Ciencias Fisiológicas127p.PFCHA-BecasTERMINADA