Tesis Doctorado
La extensión de ramas colaterales luego de una lesión a la médula espinal es gatillada por la degeneración axonal y depende de la expresión del receptor de neurotrofinas p75
Autor
Collyer-Saavedra, EileenTehani
Institución
Resumen
Las lesiones a la médula espinal (LME) presentan un pronóstico de recuperaciónprácticamente nulo debido a la baja capacidad regenerativa que tiene el sistema nervioso central (SNC) de los mamíferos. Este hecho estaría determinado por factores restrictivos microambientales que impiden la regeneración y no por una incapacidad intrínseca regenerativa de las neuronas del SNC. A pesar de que los axones del SNC que han sido dañados no son capaces de regenerar, luego de una LME parcial se observa cierto grado de recuperación espontánea de la función locomotora, tanto en animales de laboratorio como enhumanos. Esto se debe, en parte, a la extensión de ramas colaterales desde las fibras intactas luego del daño. Estas nuevas ramas axonales colaterales formarían un circuito alternativo querodea a la zona de daño, permitiendo la recuperación parcial de la función locomotora. A pesar de que aún no son claras las bases tisulares que están involucradas en la extensión de ramascolaterales desde fibras intactas, un posible candidato es el cambio microambiental generado por la degeneración axonal luego del daño. Diversos estudios apoyan la noción de que la degeneración axonal sería un paso clave en la estimulación de procesos asociados a la plasticidad axonal. En el sistema nervioso periférico (SNP), el injerto de un trozo de nerviopredegenerado induce la extensión de ramas colaterales desde fibras intactas. De la misma forma, en el SNC, la inducción de una lesión focal desmielinizante, induce la extensión deramas colaterales desde las fibras intactas en las zonas cercanas a la degeneración axonal. Otro de los candidatos más plausibles en la modulación de la extensión de las ramas colaterales es la familia de las neurotrofinas y sus receptores. A pesar de que se ha demostrado ampliamente que la administración exógena de neurotrofinas es capaz de aumentar el número de ramas colaterales, menos énfasis se le ha dado al rol de sus receptores. Las neurotrofinas presentandos tipos de receptores: los de la familia de receptores relacionados a la kinasa de tropomiosina (Tropomyosin-related kinase receptor, Trks), con mayor especificidad para cada neurotrofina, y el receptor p75 (p75NTR), que une de manera similar a todas las neurotrofinas y proneurotrofinas. La actividad de p75NTR depende del contexto celular y del tipo de careceptor presente. De esta forma, el p75NTR puede activar vías que llevan a la sobrevida o muerte celular, promover o inhibir el crecimiento axonal y facilitar o atenuar la proliferacióncelular. Luego de una LME, el animal mutante para p75NTR presenta un aumento en la sobrevida de oligodendrocitos, pero una disminución del número de neuronas presentes en el sitio de daño. Además exhibe una menor recuperación locomotora comparado con el animal normal. Por lo tanto, este trabajo apunta a establecer, en primer lugar, el rol de la degeneración axonal y, en segundo lugar, el rol del receptor de neurotrofinas p75NTR, sobre la extensión de ramas colaterales desde las fibras intactas luego de una LME y su relación con la recuperación de la función locomotora. Para poner a prueba nuestra hipótesis, utilizamos tres modelos genéticos: animales mutantes WldS, que presentan un marcado retardo en la degeneraciónWalleriana en el SNP y SNC; animales mutantes para la proteína Ciclofilina D (CypD), que presentan un ligero retardo en la degeneración Walleriana del SNP debido a la inhibición de la apertura del poro de transición mitocondrial (mPTP); y animales mutantes del receptor p75NTR, que no expresan la porción extracelular del receptor. Los animales fueron sometidos a una hemisección dorso-ventral derecha a nivel de la vértebra Tl3, interrumpiendo tanto las fibras ascendentes (sensoriales) como descendentes (motoras) del lado derecho. Para medir la extensión de ramas colaterales, las fibras corticoespinales (CST) del lado izquierdo fueron trazada anterógradamente con un dextrano biotinilado (BDA) y evaluadas a nivel delengrosamiento cervical y lumbar. La recuperación locomotora fue determinada con pruebas de campo abierto bien caracterizadas para las lesiones a la médula espinal. En esta tesis, encontramos que la extensión de las ramas colaterales de las CST intactas contralaterales al daño es activada por la degeneración Walleriana y depende de la expresión del receptor p75NTR. Las pruebas locomotoras demostraron que tanto el retraso en la degeneración Walleriana como la ausencia del receptor p75NTR llevan a una menor recuperación locomotora en los animales mutantes. Sin embargo, el bloqueo de la activación del mPTP (CypD_/_) no tiene efecto sobre la extensión de las ramas colaterales o sobre la recuperación locomotora.Entender los mecanismos endógenos del crecimiento axonal luego de un daño es esencial para generar terapias efectivas para los pacientes con LME. PFCHA-Becas Doctor en Ciencias Biológicas Mención Ciencias Fisiológicas 159p. PFCHA-Becas TERMINADA