Las albúminas del suero están entre las proteínas más importantes del plasma sanguíneo y su función principal es el transporte y distribución de muchas sustancias, entre éstas las drogas. La unión de las drogas a las albúminas varía su concentración libre, y por lo tanto la eficiencia como fármaco. Por lo cual el conocer la afinidad de la proteína por la droga es de gran importancia. Las albúminas del suero humano (HSA) y de bovino (BSA) son proteínas formadas por una simple cadena de 585 aminoácidos y están compuestas de 3 dominios homólogos. La HSA contiene un único Trp214 en el dominio 11 y la BSA contiene el Trp134 ubicado en el dominio 1 y el Trp212 en el dominio 11. Ambas contienen una Cys libre en la posición 34. En otro aspecto, los sistemas de liberación de drogas (DOS) se diseñan para entregar un agente terapéutico en un sitio y tiempo específico, y con un patrón de liberación controlado. Esto mejora la farmacocínética y la efectividad del fármaco. Entre los DOS están los conjugados proteínapolímero. Considerando que se ha encontrado que las proteínas unidas a polímeros presentan importantes ventajas en sus usos farmacológicos y que además las albúminas de suero tienen la capacidad de unir ligandos y transportarlos, en este proyecto se propuso sintetizar conjugados albúminapolímero. Asimismo, evaluar el efecto de esta derivatización en la afinidad de una serie de 1 ,4-dihidropiridinas (1 ,4-DHP) cuya estructura difiere en el sustituyente en la posición 4 del anillo de dihidropiridina. El conjugado se sintetizó utilizando la única cisteína libre de ambas albúminas (Cys34) como transferente de cadena de la fotopolimerización vía radicales de la acrilamida y derivados de ésta. En este trabajo de tesis, se estudiaron las características de la unión y constantes de asociación (KA) de las 1 ,4-DHP, tanto a la BSA y HSA libres como al conjugado BSA-poliacrilamida. Para estos estudios se empleó la espectroscopia de la fluorescencia, tanto estacionaria como resuelta en el tiempo. Para la HSA, los estudios de asociación se realizaron a diferentes pH y en la presencia de hidrocloruro de guanidina. También se determinaron los parámetros termodinámicos y la estequiometria de unión para algunas drogas representativas. Asimismo, se analizaron los cambios en la estructura de la proteína por la presencia de la droga. Los resultados obtenidos indican que la cadena de polímero produce un cambio conformacional en la proteína en que los Trp cambian a un microentomo más hidrofóbico. A pesar de este cambio, la proteína conserva su capacidad de hidrolizar al p-nitrofenilacetato y su estabilidad frente a hidrocloruro de guanidina. La afinidad de las 1 ,4-DHP, medida por la constante de asociación (KA), fue similar para ambas proteínas. Las KA son del orden de 104 M- 1 y dependen de la estructura del sustituyente en la posición 4 de la dihidropiridina. El mayor valor se encontró para la droga con el sustituyente 2,3-diclorofenil (CPDHP). También, se obtuvo un alto valor para la 1 ,4-DHP con el sustituyente 2-nitrofenil (NPDHP). Sin embargo, la afinidad de la droga que contiene el sustituyente -coa- (ADHP) es considerablemente mayor para la BSA con respecto a la HSA En base a estas diferencias y al cambio conformacional en las proteínas en la presencia de la droga se postuló que la asociación de las 1 ,4-DHP a las albúminas, con la excepción del ADHP, involucra principalmente interacciones hidrofóbicas. La alta afinidad para el ADHP hacia la BSA sugiere la presencia de interacciones electrostáticas. La afinidad de las 1 ,4-DHP a la BSA conjugada, es menor que en la BSA libre. Sólo para la droga con el sustituyente -CH3 la KA es igual que para la proteína libre. Esto sugiere que el polímero causa un impedimento en la asociación de la droga a la proteína conjugada. La estequiometria de unión es ~ 1. Las constantes de unión determinadas a diferentes pH y concentraciones de hidrocloruro de guanidina sugieren que el dominio 11 de la HSA es el sitio de unión de las 1 ,4-DHP.PFCHA-BecasDoctor en Química123p.PFCHA-BecasTERMINADA