Tesis Doctorado
El organo de la línea lateral posteriór de la larva del pez cebra como un centinela y regulador del sistema inmune innato
Autor
D alencon-Alvarez, Claudia A
Institución
Resumen
Los estudios sobre la inmunidad innata y la inflamación se han beneficiado con la
incorporación del pez cebra como un modelo experimental. La reciente y creciente
atención de la comunidad científica hacia el sistema inmunológico de los peces cebra,
se basa en la capacidad de capturar imágenes in vivo y en tiempo real de los
movimientos de las células y en el reconocimiento creciente de que el pez cebra y la
inmunidad del resto de los vertebrados tienen muchos aspectos en común. Se ha
propuesto además este modelo para ser utilizado en búsqueda de fármacos usando
ensayos a gran escala. Sin embargo, las actuales condiciones para realizar estudios de
inflamación requieren necesariamente de la manipulación invasiva e individual de los
peces, hecho que limita esta posibilidad.
La línea lateral del pez cebra es un sistema sensorial externo conformado por grupos
de órganos llamados neuromastos, cada uno de los cuales se compone de un núcleo
central de células ciliadas mecanosensoriales y otras células de soporte. Los
neuromastos representan una oportunidad de entrada de patógenos en los peces, por
carecer de una cubierta epidérmica y presentar células sensoriales expuestas
directamente al ambiente exterior. Al mismo tiempo, son altamente susceptibles al
daño por agentes tóxicos presentes en el agua. Debido a lo anterior, hay una
predisposición del sistema inmune a activarse en estos órganos, lo que se manifiesta
en una elevada expresión de genes de la inmunidad en los neuromastos así como una
rápida respuesta inflamatoria luego de un evento de daño o infección en los
neuromastos.
En esta tesis demostramos que el daño específico y no invasivo de los neuromastos
mediante la exposición de las larvas de peces a concentraciones subletales de sulfato de cobre, puede inducir una significativa respuesta inflamatoria. Se comprobó la
utilidad de este método con la realización de ensayos químicos y genéticos de
búsqueda a gran escala, con el objetivo de detectar el efecto de compuestos
inmunomoduladores y mutaciones que afecten la respuesta de los leucocitos. En este
mismo ámbito se implementó la automatización del método con el diseño de un
software que cuantifica la magnitud de la reacción inflamatoria.
Adicionalmente en este trabajo nos propusimos encontrar genes esenciales para la
respuesta inmune innata y su relación con el proceso inflamatorio. Mediante
experimentos de monohíbrído inverso y análisis de secuencias encontramos un grupo
de genes que pueden ser blanco de irf5 (interferon regulatory factor 5), factor de
transcripción clave dentro del proceso inflamatorio. Finalmente iniciamos la búsqueda
de un protocolo de infección por baños de inmersión con bacterias, usando larvas de
pez cebra. PFCHA-Becas Doctor en Biotecnología 206p. PFCHA-Becas TERMINADA