Participación de la vía NF-kB en la respuesta a péptidos derivados de la proteína GP5 del virus PRRS

Abstract

The nuclear factor-κB (NF-κB) signaling pathway plays an important role during viral infection and disease development. PRRSV infections can cause abnormal activation of NF-κB, which subsequently results in an immunosuppressed state. The transcription factor NF-κB is constitutively expressed in all cells of the immune system and is mainly involved in modulating the immune response at different levels. In mammals, it is involved in inflammation, immune cell differentiation, and activation. Previous data in our group have shown that peptides derived from GP5 protein are able to modify the expression of cytokine mRNAs, increasing the expression of TNF-α, IL-1b, IL-6, and IL-12 and the interferons INFα4 and INFβ1 in an in vitro model in mouse macrophages after one hour of treatment, suggesting the polarization of macrophages to the M1 phenotype (proinflammatory phenotype). The induction of cytokine expression favored by peptides of the PRRS virus GP5 protein suggests the involvement of the NF-kB signaling pathway in response to the stimulus. Indeed, the participation of this pathway is essential for the expression of genes that respond to infectious stimuli, in this case, to viral peptides. On the other hand, virtually all members of the Toll-like receptor (TLR) family recognize a wide variety of infectious antigens and converge at some point in the activation of the NF-κB pathway. Lipopolysaccharide (LPS), for example, specifically binds to its TLR4 receptor, inducing NF-κB activation. Methods: Mouse macrophages were stimulated with two peptides derived from GP5 protein from PRRSV. One hour after, mRNA was collected, and RT-qPCR was performed.

La vía de señalización del factor nuclear-κB (NF-κB) juega un papel importante durante la infección viral y el desarrollo de enfermedades. Las infecciones por PRRSV pueden causar una activación anormal de NF-κB, que posteriormente resulta en un estado inmunosuprimido. El factor de transcripción NF-κB se expresa de forma constitutiva en todas las células del sistema inmunitario y está implicado principalmente en la modulación de la respuesta inmunitaria a diferentes niveles. En los mamíferos participa en la inflamación, la diferenciación y la activación de las células inmunitarias. Datos previos de nuestro grupo han demostrado que los péptidos derivados de la proteína GP5 son capaces de modificar la expresión de los ARNm de citoquinas, aumentando la expresión de TNF-α, IL-1b, IL-6 e IL-12 y los interferones INF-α 4 e INF-β1 en un modelo in vitro en macrófagos de ratón después de una hora de tratamiento, lo que sugiere la polarización de los macrófagos al fenotipo M1 (fenotipo proinflamatorio). La inducción de la expresión de citocinas favorecida por péptidos de la proteína GP5 del virus PRRS sugiere la implicación de la vía de señalización de NF-kB en respuesta al estímulo. De hecho, la participación de esta vía es fundamental para la expresión de genes que responden a estímulos infecciosos, en este caso a péptidos virales. Por otro lado, prácticamente todos los miembros de la familia de receptores tipo Toll (TLR) reconocen una amplia variedad de antígenos infecciosos y convergen en algún punto de la activación de la vía NF-κB. El lipopolisacárido (LPS), por ejemplo, se une específicamente a su receptor TLR4, lo que induce la activación de NF-κB. Métodos: Se estimularon macrófagos de ratón con dos péptidos derivados de la proteína GP5 de PRRSV. Una hora después, se recolectó el ARNm y se realizó RT-qPCR.