doctoralThesis
La acetiltransferasa de histonas TGF-1 es el coactivador de genes inducibles por la luz azul en Trichoderma atroviride
Autor
Uresti Rivera, Edith Elena
Resumen
Tesis (Doctorado en Ciencias en Biología Molecular) "En el hongo filamentoso Neurospora crassa, las proteínas White Collar 1 y 2 (WC-1 y WC-2) regulan todas las respuestas a luz azul descritas hasta hora. La proteína WC-1 es el fotorreceptor y junto con la proteína WC-2 con la que forma un complejo regulador, fungen como factores transcripcionales de los genes inducibles por luz azul. La acetil transferasa de histonas NGF-1 es el coactivador de genes de respuesta a luz azul e interacciona físicamente con WC-1 para regular la fotorespuesta. En Trichoderma, las proteínas ortólogas a WC-1 y WC-2 son BLR-1 y BLR-2 respectivamente, que también regulan respuestas a la luz, formando un complejo en el que, presumiblemente, BLR-1 actúa como el fotorreceptor. En el presente trabajo se demostró que la luz azul induce la acetilación global de la histona H3. La mutante del gen tgf-1, el cual codifica probablemente para una acetil transferasa de histonas, presenta un fenotipo pleiotrópico, afectando especialmente el crecimiento y desarrollo de T. atroviride. Diversos análisis transcripcionales y de inmunoprecipitación de la cromatina (ChIP) demostraron que la proteína TGF-1 es un coactivador de genes que responden a luz azul, probablemente a través de la acetilación de los residuos de lisina K9 y K14 de la histona H3 que forma parte de la cromatina asociada a los promotores de dichos genes. Demostramos también que se requiere de TGF-1 en la oscuridad para mantener los niveles basales del gen bld-2 (blue light down regulated 2) que está regulado negativamente por luz azul. Además se requiere, después de un pulso de luz azul, de la presencia de TGF-1 para llevar a cabo la acetilación transitoria de la histona H3 del promotor del gen phr-1." "In the filamentous fungus Neurospora crassa, the White Collar -1 and 2 proteins (WC-1 and WC-2) regulate all known responses to blue light. The WC-1 protein is the photoreceptor and together with WC-2 function as transcription factors of blue light inducible genes. The histone acetyltransferase NGF-1, the orthologue of Gcn5 from Saccharomyces cerevisiae, is the co-activator of blue light induced genes in N. crassa and physically interacts with WC-1 to regulate blue light response. In Trichoderma, the WC-1 and WC-2 orthologues, BLR-1 and BLR-2, regulate as well blue light responses. BLR-1 has been proposed as the blue light receptor. Here we show that blue light induced a global acetylation of histone H3. Deletion of tgf-1, which encodes a putative acetyl transference, the orthologue of NGF-1, led to a pleiotropic phenotype, mainly affecting growth and development. Transcription and Chromatin immunoprecipitation (ChIP) analyses showed that TGF-1 is the co-activator of blue light regulated genes, probably by acetylating the K9 and K14 lysine residues of histone H3 on the promoters in T. atroviride. Furthermore, we demonstrate that TGF-1 is necessary to maintain the basal level of expression of bld-2 in the dark. TGF-1 was necessary for histone H3 acetylation of the promoter of phr-1 (blue light upregulated) after a blue light pulse, since the Δtgf-1 mutant showed no histone H3 acetylation on the phr-1 promoter."