Tesis de doctorado
Actividad antibacteriana de extractos vegetales en cepas hospitalarias de Staphylococcus aureus con resistencia múltiple
Autor
García Luján, Concepción
Resumen
"El surgimiento de la resistencia en cepas patógenas bacterianas es un problema de salud a nivel mundial. Las cepas patógenas resistentes han surgido principalmente en los hospitales a consecuencia de varios factores como son el amplio uso de antibióticos, las dosis utilizadas, el tiempo de tratamiento, y la eliminación de la mitad de la droga que no se alcanza a metabolizar en su totalidad, otros elementos que influyen son las altas posibilidades de transmisión ó contagio y el estado inmunocomprometido de los pacientes que los hace susceptibles a infecciones con patógenos oportunistas. A nivel celular, los principales mecanismos de la resistencia y de la resistencia múltiple a los antibióticos incluyen sistemas de eflujo activo de la droga, mutaciones que resultan en alteraciones de la permeabilidad celular, degradación celular de los antibióticos y alteraciones de sus blancos celulares por mutaciones o por mutilación. Específicamente en los estafilococos, y como resultado de su adaptación a tejidos, estos patógenos causan muchos síndromes patológicos como abscesos en la piel e infecciones de heridas, osteomielitis, endocarditis, neumonía, meningitis, bacteriemia, síndrome de shock tóxico, osteomielitis y envenenamiento por alimentos. Debido a que las cepas de Staphylococcus aureus colonizan continuamente la piel humana, son expuestas a todas las terapias con antibióticos, surgen entonces los microorganismos resistentes, estas cepas se pueden diseminar muy rápidamente por contacto directo en las poblaciones humanas, como se ejemplifica con la amenaza mundial de los S. aureus resistentes a la meticilina (MRSA)(los cuales presentan resistencia a la primera línea de antibióticos como la ampicilina y la penicilina) y con los S. aureus resistentes a la vancomicina (VRSA). Las opciones de agentes antimicrobianos utilizadas en las terapias para el tratamiento de las enfermedades infecciosas causadas por las bacterias con resistencia múltiple están por lo tanto seriamente limitadas. Las compañías farmacéuticas están buscando drogas alternativas de otras fuentes incluyendo las plantas y los animales. Las plantas medicinales son consideradas como una fuente potencial de nuevas drogas quimioterapéuticas debido a su contenido de fitoquímicos y a su poco o nulo efecto tóxico. Ciertamente, las plantas poseen un enorme y desconocido reservorio de sustancias derivado de sus sistemas de defensa en contra de microorganismos, insectos y herbívoros. Aunque se han identificado algunas sustancias simples como fenoles, derivados de los fenoles (quinonas, flavonas, flavonoides, flavonoles, taninos y cumarinas), terpenoides, aceites esenciales, alcaloides, lectinas y polipéptidos. Uno de los mecanismos para la inducción de la resistencia es la presión selectiva a la que se someten las bacterias, pero como el uso de extractos vegetales a nivel hospitalario es limitado, las bacterias no han desarrollado mecanismos de resistencia en su contra. Entonces es posible que los extractos puedan inhibir el crecimiento de cepas con resistecia múltiple. Por lo anterior, el objetivo de este trabajo fue valorar la actividad antimicrobiana in vitro de ocho extractos vegetales y dos aceites esenciales en contra de varias cepas hospitalarias con resistencia múltiple de S. aureus y una cepa de referencia (ATCC 25923). Los extractos alcohólicos e hidroalcohólicos evaluados fueron: perejil (Petroselinum sativum), ruda (Ruta graveolens), tomillo (Thymus vulgaris), y gobernadora (Larrea tridentata); y los aceites esenciales de clavo (Syzygium aromaticum) y de orégano (Lippia graveolens), determinando las concentraciones mínimas inhibitorias mediante el método de macrodilución. La determinación de los componentes químicos principales de los extractos se realizó mediante cromatografía de gases-masas. En las pruebas de actividad antibacteriana, los resultados muestran que no existió diferencia en entre las concentraciones mínimas inhibitorias (2.77 mg mL-1) de los extractos vegetales alcohólicos y los hidroalcohólicos en todas las cepas, mientras que los aceites esenciales inhibieron el crecimiento bacteriano a concentraciones mínimas inhibitorias variables e inferiores a las de los extractos alcohólicos. Los resultados mostraron que los componentes químicos más abundantes en los extractos fueron el etil ester ácido hexadecanoico, fitol, cariofilenos, timol y para-cimeno. Los compuestos estudiados tienen una aplicación potencial como antibacterianos por lo que se sugiere medir sus propiedades farmacéuticas para establecer su uso como agentes terapéuticos" "The emergente of the resistance in bacterial pathogenic strains is a problem of health at world-wide level. The resistance pathogenic strains have arisen mainly in the hospitals as a result of several factors as they are the ample antibiotic use, the used doses, the time of treatment, and the elimination of half of the drug that is not reached to metabolizar in its totality, other elements that influence are the high possibilities of transmission or infect and the immunocompromissed state of the patients that makes susceptible to infections with opportunistic pathogens. At cellular level, the main mechanisms of the resistance ant the multidrug resistance to antibiotics include systems of active efflux of the drug, mutations that are in alterations from the cellular permeability, cellular degradation of antibiotics and alterations of their cellular targets by mutations o methilation. Specifically, in the staphylococci, and as resulting from their adaptation to weaves, these pathogens to many pathological syndromes like abscesses in the skin and infections of wounds, osteomielitis, endocarditis, pneumoni, meningitis and foodborne poisons. Because the strains of Staphylococcus aureus colonize the human skin continuously, are exposed to all the therapies with antibiotics, arise then the resistant microorganisms, these strains can be scattered very quickly by direct bonding in the community, as the word-wide threat of S aureus resistant to methicillin (MRSA)(wich offer resistance to forward edge of antibiotics like the ampicillin and penicillin) and with the S aureus vancomycin resistant (VRSA). The options of used antimicrobial agents in the therapies for the treatment of the infectious diseases caused by the bacteria with multiple resistance therefore are seriously limited. The pharmaceutical companies are looking for alternative drugs of other sources including plants and animals. The medicinal plants are considered like a potential source of new quimiotherapheutics drugs due to the content of phytochemicals and to their little or null poisonus effect. Certainly, the plants have enormous and a stranger reservorio of substances derived from their systems of defense against , insects and herviborous. Although some simple substances like phenolics heve been identified, derives of the phenolics (quinonas, flavonas, flavonoides, flavonles, tannins and cummarinas), essential oils, terpenoids, alkaloids, lectinas and polipeptides. One of the mechanisms for the induction of the resistance is the selective pressure which the bacteria are put under, but as the use of herb extracts at nosocomial level is limited, the bacteria have not developed mechanisms of resistance in his against. Then it is possible that the extracts can inhibit the growth of multidrug resistant strains. Therefore the aim of the present work was to assess the antimicrobial activity in vitro of eight herbal extracts and two essential oils against various multidrug resistant nosocomial strains of S. aureus and reference one (ATCC 25923). The evaluated extracts are both alcoholic and hidroalcoholic were: parsley (Petroselinum sativum), rue (Ruta graveolens), thyme (Thymus vulgaris), creosote bush (Larrea tridentata); and the essential oils of clove (Syzygium aromaticum) and oregano (Lippia graveolens), to determining the minimum inhibitory concentrations by means of the macrodilution method. Determination of main chemical components was performed by mean of espectrophotometry of gas-mass. The antibacterial tests showed that did not exist differences in the minimum inhibitory concentrations (2.77 mg mL-1) for the vegetable alcoholic and hidroalcoholic extracts in the strains, while the essential oils inhibited the bacterial growth at a lesser and variable minimum inhibitory concentrations than those of the alcoholic extracts. The results showed that the most abundant chemical components were: hexadecanoic acid etil ester, phytol, cariophyllene, thymol and p-cymene. The studied compounds have a potential application as antibacterials for what is suggested to measure their pharmaceutical properties to establish their use as a therapeutic agents"