Caracterización parcial de las biomoléculas de alternaria alternata MVSS-AH-5 involucradas en la biorreducción de metales

Abstract

RESUMEN: La habilidad de cuatro filtrados extracelulares (FE) obtenidos de la biomasa de A. alternata al ser crecida en cuatro medios de cultivo diferentes, nombrados Caldo Malta Dextrosa (CMD), Caldo Papa Dextrosa (CPD), Sacarosa (S) y Czapek (C), fueron evaluados para biosintetizar nanoparticulas de hierro (FeNPs). Para evidenciar la biosíntesis de nanoparticulas se realizó un barrido en el espectro de absorción UV-Vis de 200 a 600 nm a todas las muestras, y analizadas por microscopía electrónica de transmisión (TEM). La forma y tamaño de las FeNPs sintetizadas fue estudiada usando el software SPIP 6.2.0. De los cuatro filtrados extracelulares empleados, la biosíntesis de las nanoparticulas fue posible solo en los FE-CPD y FE-C, evidenciando su presencia en el espectro UV-vis al formar una banda de absorción a los 226 y 225 nm respectivamente, y una meseta alrededor de los 270 nm para el FE-CPD, y 290 nm para el FE-C. Las nanopartículas sintetizadas presentaron forma esférica y polidispersas, las sintetizadas con el FE-CPD presentaron tamaños de 20-40 nm, mientras que las sintetizadas con el FE-C tuvieron tamaños de 10-80 nm. Después de seis meses de producción, las nanopartículas obtenidas con el FE-C se analizaron por microscopía mostrando un aumento de tamaño de hasta 5 μm aproximadamente, posiblemente debido a la atracción magnética de estos materiales. Para el FE-S un pico de 231 nm fue observado pero las imágenes TEM mostraron la formación de microcristales de hierro, y cristales de hierro para el FE-CMD cuya intensidad máxima de absorción estuvo entre los 225 a 303 nm. El medio de cultivo empleado para producir la biomasa del hongo y obtener el FE tiene una influencia en la biosíntesis de nanoparticulas de hierro, aun en el caso del mismo microorganismo. Las FeNPs biosintetizadas por A. alternata podrían ser empleadas en la remoción de contaminantes o como agentes microbianos contra bacterias de importancia clínica o agrícola. ABSTRACT: The ability of four extracellular filtrates (FE), obtained from A. alternata biomass grown in four different culture media; malt dextrose broth (MDB), potato dextrose broth (PDB), sucrose (S) and Czapek (C), were evaluated to biosynthesize iron nanoparticles (FeNPs), at the end of the assay a brown color was revealed in all the samples. To evidence biosynthesis of nanoparticles, absorption spectra were made from 200 to 600 nm for all the samples and, analyzed by transmission electronic microscopy (TEM). The morphology and size of the synthesized FeNPs were studied using the SPIP 6.2.0 software. From the four extracellular filtrates assays, the nanoparticles biosynthesis was possible only in the EF-PDB and EF-C, showing their presence in the UV-vis spectrum when forming an absorption band at 226 and 225 respectively, and plateau around at 270 nm to EF-PDB, and 290 nm to EF-C. The synthesized nanoparticles presented spherical and polydisperse form, those synthesized with EF-PDB showed a size of 20-40 nm, while those synthesized with EF-C had a size of 10-80 nm. Six months after their production, the FeNPs biosynthesized by EF-C were analyzed by microscopy showing an Mexican Journal of Biotechnology 2019, 4(4):1-14 Journal homepage:www.mexjbiotechnol.com ISSN:2448-6590 ORIGINAL RESEARCH 2 Alamilla-Martínez et al. / Mexican Journal of Biotechnology 2019,4(4):1-14 increase forming 5 μm microparticles, possibly due to magnetic attraction of these materials. To EF-S a peak at 231 nm was detected, but TEM images show formation of iron microcrystals, and iron crystals in EF-MDB which maximum intensity of absorption between 225-303 nm. Culture media used to produce the fungus biomass and get EF have influence in the iron nanoparticles biosynthesis, even in the case of the same microorganism. The FeNPs biosynthesized by A. alternata could be used in the removal of contaminants or as microbial agents against bacteria of clinical or agricultural importance.