Thesis
Evaluación in vivo de la actividad antigiardia y biotransformación in vitro de tres flavonoides de origen natural Camperol, (-)-Epicatequina y Tilirósido
Fecha
2009-08-13Registro en:
Barbosa Cabrera, Reyna Elizabeth (2007). Evaluación in vivo de la actividad antigiardia y biotransformación in vitro de tres flavonoides de origen natural Camperol, (-)-Epicatequina y Tilirósido (Doctorado en Ciencias en Investigación en Medicina). Instituto Politécnico Nacional, Sección de Estudios de Posgrado e Investigación, Escuela Superior de Medicina, México.
Autor
Barbosa Cabrera, Reyna Elizabeth
Institución
Resumen
RESUMEN: Los flavonoides camperol, (-)-epicatequina y tilirósido, fueron aislados de las especies Cuphea pinetorum Benth, Geranium mexicanum HBK, Helianthemum glomeratum Lag, y Rubus coriifolius, estas especies vegetales son empleadas en la medicina tradicional para el tratamiento de enfermedades gastrointestinales causadas por protozoarios como la diarrea y la disentería. Estos flavonoides y los extractos vegetales de las especies H. glomeratum y R. coriifolius, fueron evaluados in vivo para demostrar su efecto contra Giardia lamblia. Las DE50 (mg/kg) obtenidas para los extractos y los fármacos utilizados como referencia fueron las siguientes: 0.125 para H. glomeratum, 0.506 para R. coriifolius, 0.194 y 0.167 para metronidazol y emetina respectivamente. Los flavonoides evaluados mostraron actividad antigiardia con valores de DE50 (µmol/kg) de 0.072 para la (-)-epicatequina, 2.057 para el camperol y 1.429 para el tilirósido. Ambos extractos mostraron actividad antigiardia, el extracto de H. glomeratum fue más activo que el extracto de R. coriifolius y su actividad es comparable con la del metronidazol y la emetina. El flavonoide más activo fue la (-)-epicatequina, su actividad fue mayor a la de los fármacos de referencia. En el caso del camperol y el tilirósido, la actividad de éstos es similar a la del metronidazol, pero son menos activos que la emetina. Respecto al metabolismo in vitro de los flavonoides, la identificación de los fenoles simples se realizó por comparación de los tiempos de retención con estándares. Para el camperol se identificaron cuatro metabolitos, floroglucinol, ácido 4-hidroxicinámico, ácido p-hidroxibenzoico y ácido 3-(p-hidroxifenil)- propiónico, para el tilirósido se identificaron dos metabolitos, floroglucinol y ácido 4-hidroxicinámico, para la (-)-epicatequina se identificaron tres metabolitos, el ácido p-hidroxifenilacético, el ácido 3,4-dihidroxihidrocinámico y su epímero la (+)-catequina. La identificación de estos productos de biotransformación, nos permite concluir que el metabolismo de los flavonoides por G. lamblia es similar al descrito para la microflora de humanos, conejos, ratas y cepas bacterianas. Este es el primer informe sobre la actividad antigiardia in vivo para los flavonoides y los extractos vegetales de H. glomeratum y R. coriifolius. Considerando la actividad antigiardia in vivo de los flavonoides evaluados y la presencia de éstos en los extractos crudos o fracciones de C. pinetorum, H. glomeratum, R. coriifolius y G.mexicanum, constituye una evidencia adicional que explica el uso de las plantas para tratar la diarrea. Además, la actividad antigiardia in vivo e in vitro demostrada para estos extractos, los convierte en fuentes potenciales para el desarrollo de nuevos fitofármacos. Este también es el primer informe acerca del metabolismo de los flavonoides por los trofozoítos de G. lamblia. ABSTRACT: Mexican traditional medicine uses a great variety of plants in the treatment of intestinal diseases such as diarrhea. In order to understand the properties of some medicinal plants and their chemical constituents, three flavonoids (kaempferol, tiliroside and (-)-epicatechin) and extracts from Helianthemum glomeratum and Rubus coriifolius were evaluated in vivo against G. lamblia. The antigiardial activities were demonstrated using experimental infections of Giardia lamblia in suckling female CD-1 mice. The ED50 (mg/kg) obtained for the extracts and drugs used as reference was 0.125 for H. glomeratum, 0.506 for R. coriifolius, 0.194 for metronidazole and 0.167 for emetine. Compounds tested showed antigiardial activity with values of ED50 (µmol/kg) 0.072 for (-)- epicatechin, 2.057 for kaempferol and 1.429 for tiliroside. Both extracts showed antigiardial activity, however the extract of H. glomeratum was more active than the extract of R. coriifolius, and its activity was comparable to metronidazole and emetine. The most active flavonoid was the (-)-epicatechin, its activity was higher than metronidazole and emetine, drugs used as positive controls. In the case of kaempferol and tiliroside their potency was closed to that of the metronidazole, but far less than emetine. The in vitro biotransformation of flavonoids, lead to the identification of four metabolites from kaempferol, these were identificated as phloroglucinol, 4- hydroxycinnamic acid, p-hydroxy-benzoic acid, and 3-(p–hydroxyphenyl)- propionic acid; from tiliroside two metabolites were identificated, phloroglucinol and 4-hydroxycinnamic acid; from (-)-epicatechin three metabolites were identificated, p–hydroxyphenilacetic acid, 3,4-dihydroxyhydrocinnamic acid, and its epimer (+)-catechin. The identification of these products, allows the concluding that the metabolism of flavonoids by G. lamblia is similar to that described for the intestinal microflora, rabbits, rats and some bacteria strains. This is the first report about the in vivo antigiardial activity of flavonoids and extracts from H. glomeratum and R. coriifolius. The in vivo antigiardial activity of the flavonoids assayed in this study and their presence in the crude extracts or fractions from C. pinetorum, H. glomeratum, R. coriifolius, and G. mexicanum, supports the use of these plants in the treatment of diarrhea. In addition, the in vivo and in vitro antigiardial activity shown by these extracts, allows their use as potential sources for the development of new phytodrugs. This is the first report about the in vitro metabolism of flavonoids by G. lamblia trophozoites.