Asociación de los polimorfismos del gen CYP1B1 en pacientes con glaucoma congénito primario esporádico

Abstract

RESUMEN: Los glaucomas son un grupo heterogéneo de enfermedades que combinan una presión intraocular elevada y degeneración del nervio óptico lo que lleva a la ceguera. Los glaucomas se clasifican en tres categorías: de ángulo abierto y ángulo cerrado, dependiendo de los mecanismos por los que el flujo del humor acuoso es bloqueado, y una tercera, el glaucoma congénito. El glaucoma congénito primario (GCP) es un padecimiento que se manifiesta en el período neonatal o infantil y su frecuencia aproximada varía de 1 en 5,000 a 1 en 10,000 recién nacidos vivos. En general, una parte importante de casos de GCP son familiares y presentan un patrón de herencia autosómico recesivo. El GCP es un padecimiento genéticamente heterogéneo. Mutaciones en el gen CYP1B1 representan 85% de los casos de GCP, indicando que son la causa más común de GCP. Se han reportado distintos polimorfismos en diversas poblaciones para el gen CYP1B1. De éstos, 5 de ellos resultan en substituciones de aminoácidos: Arg48Gly, Ala119Ser, Val432Leu, Ala443Gli y Asn453Ser. Aún cuando mutaciones deletéreas en el gen CYP1B1 son las responsables del GCP familiar, este tipo de cambios así como los polimorfismos presentes en el gen CYP1B1 no se han analizado en los casos esporádicos con este padecimiento, por lo que el objetivo del presente estudio es determinar si existe una asociación entre los polimorfismos del gen CYP1B1 y los casos con GCP esporádicos. Para determinar la asociación se obtuvo DNA genómico de leucocitos de pacientes y controles sanos, se amplificaron las regiones codificantes del gen CYP1B1 mediante PCR y se secuenciaron mediante un secuenciador automatizado. El análisis estadístico se realizó mediante la prueba de Fischer. El análisis de secuenciación de DNA de nuestros pacientes mostró los diferentes polimorfismos en la región codificante del gen CYP1B1. Estos polimorfismos no co-segregaron con el GCP y fueron observados también en controles sanos (p>0.05). Por otra parte, se encontraron 4 mutaciones nuevas mutaciones deletéreas en el gen CYP1B1 en pacientes causativas de GCP. Finalmente, en el presente trabajo encontramos algunas diferencias respecto a previas investigaciones como son: una frecuencia más baja del alelo silvestre y una frecuencia baja de mutaciones en el gen CYP1B1 causativas de GCP. No fue posible identificar variaciones en la frecuencia de polimorfismos entre la población afectada y los controles sanos. Estos hallazgos pueden tener importantes implicaciones para el diagnóstico, tratamiento oportuno y asesoramiento genético para prevenir la ceguera en familias predispuestas.

ABSTRACT: Glaucomas are a heterogeneous group of diseases that combine high intraocular pressure and degeneration of the optic nerve leading to blindness. Glaucomas are classified into three categories: open angle and closed angle, depending on the mechanisms by which the flow of aqueous humor is blocked, and a third, congenital glaucoma. Primary congenital glaucoma (PCG) is a condition that manifests itself in the neonatal or childhood period and its approximate frequency varies from 1 in 5,000 to 1 in 10,000 live births. In general, an important part of GCP cases are familiar and present an autosomal recessive inheritance pattern. GCP is a genetically heterogeneous disease. Mutations in the CYP1B1 gene represent 85% of GCP cases, indicating that they are the most common cause of GCP. Different polymorphisms have been reported in diverse populations for the CYP1B1 gene. Of these, 5 of them result in amino acid substitutions: Arg48Gly, Ala119Ser, Val432Leu, Ala443Gli and Asn453Ser. Although deleterious mutations in the CYP1B1 gene are responsible for the family GCP, this type of changes as well as the polymorphisms present in the CYP1B1 gene have not been analyzed in sporadic cases with this disease, so the objective of the present study is to determine if there is an association between CYP1B1 gene polymorphisms and sporadic PCG cases. To determine the association, leukocyte genomic DNA was obtained from healthy patients and controls, the coding regions of the CYP1B1 gene were amplified by PCR and sequenced by an automated sequencer. The statistical analysis was performed using the Fischer test. The DNA sequencing analysis of our patients showed the different polymorphisms in the coding region of the CYP1B1 gene. These polymorphisms did not co-segregate with the GCP and were also observed in healthy controls (p> 0.05). On the other hand, 4 mutations were found to be new deleterious mutations in the CYP1B1 gene in patients with GCP. Finally, in the present work we find some differences with respect to previous investigations such as: a lower frequency of the wild allele and a low frequency of mutations in the gene CYP1B1 causative of GCP. It was not possible to identify variations in the frequency of polymorphisms between the affected population and healthy controls. These findings may have important implications for diagnosis, timely treatment and genetic counseling to prevent blindness in predisposed families.