proyecto
Validación y Empaquetamiento Técnico-comercial de Nuevos Servicios de Expresión Génica Basados en Sets Rt-qpcr Múltiples para Evaluar el Estado Fisiológico de Salmones en Cultivo
Registro en:
15ITE2-47464
2015-47464-INNOVA_PRODUCCION
Autor
Paula Macarena Heinsohn F. X- Region
Laboratorio de Anatomía Patológica Veterinaria Pathovet Limitada
Institución
Resumen
Validar y Empaquetar Comercialmente un Prototipo de Servicios de Laboratorio Basados en Sets de Biomarcadores Moleculares en Formato Rt-qpcr Múltiple para su Aplicación Práctica en la Evaluación Integral del Estado Fisiológico de Salmónidos en Cultivo con Foco en la Respuesta Inmune para Evaluar Eficacia de Vacunas Funcionalidad Hepática como Respuesta a Aditivos Nutricionales y la Habilidad Hipo-osmorregulatoria de Smolts (momento de Esmoltificación y Traslado a Mar). Se Propone Estandarizar Validar y Empaquetar Nuevos Servicios en Base Molecular (rt-qpcr Mútiples) de Apoyo a la Toma de Decisiones Sanitarias y Productivas Estratégicas para las Empresas Productoras de Salmón Cultivado (clientes/mercado). Estos Servicios se Orientarán Principalmente a la Cuantificación Relativa de la Expresión de Genes Agrupados como Sets de Biomarcadores (rt-qpcr Múltiples) para Evaluar la Respuesta Inmune Innata (sets Innata-gen®) Adaptativa Humoral (sets Humoral-gen®) y Celular (sets Celular-gen®) Funcionalidad Hepática (sets Bioliver-gen®) y Esmoltificación (sets Smoltclock-gen®) Utilizando como Plataforma Analítica la Técnica Rt-qpcr Taqman Multiplex. Este Formato Rt-qpcr Taqman Multiplex Permitirá Reducir Significativamente los Costos de Análisis de un Espectro Amplio de Genes y Mejorará su Demanda en el Mercado. Adicionalmente para el Servicio de Respuesta Inmune se Validarán Dos Ensayos de Elisa para Cuantificación de Anticuerpos Específicos (igm) contra los Patógenos P. Salmonis e Ipnv Respectivamente que Permitirán Respaldar Fenotípicamente la Respuesta del Hospedero. La Propuesta Considera la Estandarización de la Fase Pre-analítica Particularmente la Toma de Muestras Transporte y Almacenamiento las que Son Críticas para la Mantención de la Calidad de los Rna Mensajeros (mrna) Cuya Vida Media y Estabilidad Son Mucho Menores que las del Rna de Doble Hebra Componente del Genoma de Muchos de los Virus de Peces Detectados Comúnmente por Rt-qpcr en los Laboratorios de Diagnóstico. Luego la Fase Analítica Será Estandarizada y Validada en Dos Etapas: 1) Formato de Reacciones de los Genes Individuales como Rt-qpcr Taqman Simple ( Gold Standard) Etapa que Tenemos Aboradado a Través de un Proyecto Previo, 2) Etapa de Estandarización y Validación de los Genes en el Formato Multiplex. Con esto se Aplicarán los Sets Rt-qpcr Multiplex en Condiciones de Campo bajo Diseños Experimentales Apropiados para Cada Uno. Los Resultados Esperados Involucran la Capacidad de los Sets de Biomarcadores de Generar Perfiles de Expresión Reproducibles. la Propuesta Considera el Empaquetamiento de los Sets Considerando Distintas Condiciones de Campo Tales como Etapas Productivas en que los Peces se Enfrentarán a Distintos Desafíos Naturales con Infecciones Virales (ipnv) en Agua Dulce y Bacterianas en Agua de Mar (p. Salmonis Srs) o Sufrirán Cambios Fisiológicos Importantes como la Esmoltificación cuyo Monitoreo es Crucial para el Traslado de los Peces a Agua de Mar. Los Biomarcadores Desarrollados Entregarán un Conocimiento Objetivo Oportuno y Confiable Respecto de la Condición Sanitaria Nutricional Metabólica y Fisiológica de los Peces. Complementariamente la Estandarización del Método para Manejar los Animales con el Objetivo de Obtener/extraer las Muestras de Tejido y Rna de Calidad Óptima Servirá No Sólo para Conseguir los Resultados de Validación Sino para su Posterior Aplicación en Terreno por los Clientes que Utilizarán Rutinariamente los Servicios Diagnósticos Desarrollados. Así se Desarrollará un Protocolo Estandarizado de Toma de Muestras de Tejidos para Análisis mediante Stes Rt-qpcr Múltiples Aplicados a Evaluar Respuesta Inmune Funcionalidad Hepática o Esmoltifciación. Esto Complementará la Validación de los Perfiles de Expresión Génica Puesto que Está Descrito que la Mayoría de los Errores que Determinan Alteraciones en la Reproducibilidad de Resultados de este Tipo de Servicios Están Asociados con los Puntos Críticos durante el Procedimiento Pre-analítico de las Muestras es Decir Toma de Muestras Disposición y Transporte. De Esta Manera la Propuesta Genera una Solución Complementaria para el Diagnóstico y Cuantificación de la Respuesta Patológica de los Peces en Distintos Estados Fisiopatológicos que Permitirá Obtener Información Objetiva Cuantificada Validada y Predictiva de la Respuesta del Hospedero Frente a una Determinada Etapa Productiva y Estado Fisiopatológico Potenciando Nuestra Visión de Focalizar Nuestra Oferta de Servicios hacia la Medicina Preventiva Más que la Curativa Basada en la Evaluación de la Respuesta del Hospedero y de la Población Sana. Su Aplicación Predictiva Permitirá Mejorar la Gestión Sanitaria y Productiva de los Clientes Aportando a Minimizar las Pérdidas de la Biomasa en Cultivo y su Consecuente Expresión Económica y Optimizar la Distribución de Recursos Involucrados en la Aplicación de Medidas Profilácticas Manejo y Control por Ejemplo: 1) Reducción de la Pérdida de Desadaptados por Mala Esmoltificación, 2) Reducir la Mortalidad de Peces y Uso de Antibióticos en el Tratamiento de Infecciosas Bacterianas Tales como la Piscirickettsiosis (srs) Mejorando las Vacunas para el Control, 3) Mejorar las Tasas de Conversión de Alimentos Sobrevivencia de Biomasa Bienestar Animal o Stress con Aditivos Nutricionales Efectivos. Finalmente el Empaquetamiento de nuestros Prototipos Redundará en el Crecimiento de Nuestras Ventas por Concepto de Más y Mejores Servicios de Laboratorio Incremento en Número de Clientes y en Consecuencia Incremento Significativo de Nuestra Productividad Competitividad y Diferenciación en el Mercado. Corporación de Fomento de la Producción