Adquirir el Conocimiento y la Tecnología I+d Necesaria para Implementar Procesos Productivos de Base Recombinante como una Nueva Línea de Producción Tecnológica en la Empresa Laboratorios Pasteur mediante la Vinculación y el Trabajo Colaborativo con el Centro de Biotecnología y Biomedicina. Validar Esta Adquisición mediante el Establecimiento de un Proceso Productivo de Alto Rendimiento para la Producción de Interferón Alfa Recombinante Humano Soluble (hifnarec) para Ser Usado con Fines Terapéuticos en el Tratamiento de Afecciones de Carácter Viral.Definición del Proceso Productivo del Ingrediente Farmacéutico Activo (ifa) de Ifnalfa Recombinante. Descripción: a Partir de una una Cepa Experimental de la Bacteria E. Coli Modificada Genéticamente en los Laboratorios del Centro de Biotecnología y Biomedicina (cbb) que Produce una Variante Antiviral Soluble del Interferón Alfa Humano Recombinante (hifnarec) se Evaluarán Diferentes Medios de Cultivo que Garanticen la Solubilidad de la Proteína de Interés se Establecerán las Condiciones de Cultivo en Fermentador Experimental de 5l se Realizará un Estudio para el Escalado de la Etapa de Fermentación Calculando el Patrón Reológico del Cultivo Definiendo los Flujos de Alimentación de Medio y el Volumen de Aire a Suministrar. a Partir de las Condiciones Definidas a Escala de 5 L se Evaluarán los Parámetros Necesarios para el Escalado Productivo del Proceso de Fermentación a Niveles de 50 L. De Forma Análoga se Desarrollará a Escala de Laboratorio el Proceso de Recobrado y Purificación y a Partir de Aquí se Definirán las Variables que Permitan Controlar el Escalado del Proceso hasta Niveles Equivalentes a 50 L de Cultivo. Como Parte Final de este Objetivo se Reproducirá Todo el Proceso de Obtención del Ingrediente Farmacéutico Activo en las Instalaciones de Laboratorios Pasteur con al Menos Tres Lotes de Producción.Definir las Condiciones Óptimas de Extracción y Purificación de la Proteína Hifnalfarec Obtenida en Cultivos de E. Coli. Para Cumplir este Objetivo Tenemos Que:-definir las Condiciones de Ruptura y Extracción de la Proteína de Interés a Partir del Debris Celular con el Fin Recuperar la Mayor Cantidad de Hifnalfarec Soluble. -evaluar las Matrices Cromatográficas y sus Condiciones de Operación para Garantizar la Obtención del Producto con la Mayor Pureza y Rendimiento a Escala Experimental. -evaluar los Volúmenes de Matrices Cromatrograficas y Flujos de Operación que Permitan el Procesamiento del Material Obtenido en 50lt de Cultivo para Mantener los Niveles de Pureza y Recuperaciòn Obtenidos a Nivel Experimental. -realizar Tres Lotes Productivos para la Validación del Escalado del Proceso de Purificación. Lograr la Reproducibilidad del Proceso Considerando la Incidencia de Factores No Controlados.Definir los Medios y Condiciones de Cultivo que Permitan la Producción del Hifnalfa Rec en Forma Soluble en Biorreactores de 50l. Para Cumplir con este Objetivo Tenemos que :-identificar el Medio de Cultivo Adecuado Considerando la Variabilidad de Diferentes Compuestos que Pueden Afectar el Crecimiento. -identificar las Condiciones (ph Temperatura de Crecimiento Agitación Aireación Concentración de Iptg Momento de Inducción Temperatura de Inducción) en Biorreactores de 5l que Garanticen el Mejor Rendimiento y el Mayor Porcentaje de Proteína Soluble. -lograr Repetir a Escala de 50l los Resultados Obtenidos a 5l Considerando la Variabilidad de Condiciones entre Ambas Escalas de Cultivos. -lograr la Reproducibilidad del Proceso Considerando la Incidencia de Factores No ControladosDemostrar Eficacia Clínica de la Formulación Tópica en Pacientes con Infecciones Vaginales Producidas por el Virus del Vph. Descripción: se Fabricará un Prototipo Validado Considerando Aspectos Regulatorios para Ser Probado en Prueba Clinica. Se Realizará una Prueba Clínica Preliminar con al Menos 10 Pacientes para Evaluar el Efecto sobre Infeciones Vaginales Producidas por el Virus del Vph. Para ello se Utilizará la Formulación Gelificante Desarrollada. Este Ensayo se Ejecutará con el Consentimiento Informado de los Pacientes y Siguiendo Todas las Normativas y Regulaciones Establecidas por el Isp para este Tipo de Ensayos. Al Final del Objetivo Tendremos una Validación Completa del Posible Producto para Iniciar una Etapa de Validación en Condiciones Productivas y Certificación Comercial.Determinar la Seguridad del Ifa y su Fórmula Galénica Estable. Descripción: se Evaluará la Seguridad de Hifnarec como Validación Preclínica en Modelos Murinos mediante Ensayos de Inocuidad Frente a la Administración de una Sobredosis de Hifnarec. Se Evaluarán Distintas Alternativas para la Preparación de una Formulación Gelificante que Asegure la Estabilidad de Hifnarec como Geles Basados en Polímeros Sintéticos como Carbopol o Hidroxietilcelulosa y Encapsulación en Micro o Nanopartículas que Ayuden a una Lenta Liberación del Ifa. La Integridad Biológica de Hifnarec en las Distintas Formulaciones Almacenadas a 28°c se Analizará mediante un Ensayo de Elisa. Se Estudiará la Estabilidad de la Formulación Farmacéutica Diseñada en un Ensayo de Estabilidad Acelerada a Temperaturas de 37 45 y 60°c durante un Periodo de 100 Días. Según los Resultados Obtenidos se Realizará un Ensayo de Estabilidad en Tiempo Real durante 6 Meses. En Cada Estudio se Evaluará la Actividad de Hifnarec mediante un Ensayo de Actividad Antiviral.Determinar la Viabilidad de Protección Intelectual Comercial y Modelo de Negocios del Producto. Se Realizará un Estudio de Patentabilidad a Partir de los Resultados Obtenidos. Se Realizará un Estudio de Mercado para Determinar la Viabilidad Comercial del Producto Biofarmacéutico Basado en Hifnarec y una Evaluación de los Costos del Producto en Condiciones de Producción Comercial. A Partir del Estudio de Mercado se Propondrá el Modelo de Negocios Apropiado para la Comercialización del Producto Final.Elaborar una Formulación Gelificante de Hifnalfarec que Garantice la Estabilidad y Actividad Biológica del Compuesto. Para Cumplir con este Objetivo Tenemos que :-definir la Formulación Adecuada que Sea Compatible con la Zona de Aplicación Deseada que Garantice un Elevado Nivel de Absorción en Dicha Zona y a su Vez que Asegure la Estabilidad del Producto por un Periodo Superior a los 12 Meses. -lograr Reproducibilidad en los Ensayos de Estabilidad para Entregar Datos Consistentes que Avalen la Estabilidad del Producto.Establecer Proceso de Producción del Ifa en Laboratorios Pasteurdescripción: para Dejar Establecido el Proceso de Producción del Ifa se Definirán Todos los Ensayos que Permitan un Adecuado Control de Calidad. De Manera Especial se Trabajará en los Ensayos de Elisa y Proliferación Celular para Conocer la Cantidad de Proteína y su Actividad Específica en Cada una de las Etapas del Proceso. Se Definirán Todos los Procedimientos Patrones de Operación Involucrados en Cada una de las Etapas y se Adiestrará al Personal de la Empresa en las Distintas Operaciones que Involucra Esta Producción.Con el Desarrollo de este Proyecto se Logrará mediante la Vinculación de una Empresa de Base Tecnológica y una Empresa Productora de Químicos Farmacéuticos el Diseño y Puesta en Marcha de un Proceso Productivo que Permita la Obtención de un Prototipo Preformulado que Contenga Interferón Alfa Humano Recombinante (hifnarec) como Ingrediente Farmacéutico Activo para el Tratamiento de una Serie de Afecciones Causadas por Virus como Úlceras Herpéticas Labiales y Genitales Condilomas Acuminados Verrugas Plantares Queratitis Herpética Úlceras Corneaseas Carcinoma Conjuntival Intraepitelial entre Otras. El Desarrollo de este Proyecto Contempla el Establecimiento de las Condiciones de Crecimiento de la Cepa de Escherichia Coli que Expresa Hifnarec Soluble en Fermentadores de 50 Litros Además de las Etapas Posteriores de Purificación Necesarias para Obtener la Molécula con una Pureza Adecuada para su Uso Terapéutico. Todo este Proceso Quedará Finalmente Implementado al Término del Proyecto en las Instalaciones de los Laboratorios Pasteur. Se Incluye en Esta Implementación el Montaje de las Técnicas Analíticas que Deberán Usarse para el Seguimiento y Control de la Calidad del Nuevo Proceso Productivo Así como los Protocolos de Operación que Servirán de Guía para los Operarios del Proceso y que Garantizarán su Explotación bajo Normas de Buenas Prácticas de FabricaciónCorporación de Fomento de la Producción