Introducción: El personal de salud constituye un grupo de riesgo para la infección por el virus de las hepatitis B. Objetivos: Evaluar la frecuencia de vacunación contra Hepatitis B en profesionales médicos y de enfermería de tres grandes centros hospitalarios del Departamento Central de Paraguay. Materiales y métodos: Estudio cuantitativo, observacional, descriptivo, de corte transversal. Se aplicó un cuestionario al personal médico y de enfermería en estudio, elaborado según trabajos afines. Resultados: Fueron encuestadas 1097 personas, siendo médicos 412 (37.6%) yersonal de enfermería 685 (62.4%). Se encontró un nivel de vacunación completa del 48.2% sobre el total de encuestados, 49.5% de los varones presentaron esquema completo y 47.7% de las mujeres. Según la profesión, el personal de enfermería tiene mejor acatamiento con 51% de vacunación completa contra 47% del personal médico. En el Hospital Central del Instituto de Previsión Social, casi un 62% tenía esquema completo, el Hospital de Clínicas alcanzó 40.9% y solamente 36.6% de los encuestados del Hospital Nacional de Itauguá tenían todas las dosis de vacuna anti-Hepatitis B. Para riesgo biológico bajo, el nivel de vacunación completa fue del 36.0%, alcanzó el 36.8% para riesgo moderado y 57.3% para los de alto riesgo de exposición. Conclusión: Ante la baja prevalencia de vacunación completa contra Hepatitis B en el personal de salud, esta debe mejorarse considerando el riesgo biológico de exposición. El equipo de control de infecciones y el Departamento de salud laboral deben llevar un registro de vacunación del personal y tener un plan de inmunizaciones obligatorio.