En parásitos protozoarios, las proteasas juegan un papel importante en la patogénesis de las enfermedades parasitarias. Hasta la fecha se han reconocido numerosas proteasas parasitarias; sin embargo, son el grupo de las serín-proteasas las menos estudiadas. En géneros patógenos pertenecientes a la familia de los Trypanosomatidae, las serín-proteasas han sido asociadas a la supervivencia de estos parásitos; no obstante, en tripanosomátidos monogenéticos no se han identificado esta clase de proteasas. En el presente trabajo, se identificó por primera vez la presencia de una actividad serín-proteasas en la fracción soluble (FS) de promastigotes de Leptomonas seymouri, la cual fue capaz de hidrolizar el sustrato sintético Bz-Arg-pNA (L-BAPNA) en un rango de pH comprendido entre pH 6-10 con un óptimo de actividad a pH 8. Esta actividad proteolítica fue inhibida por el TLCK, la Leupeptina y el AEBSF (inhibidores selectivos de serín-proteasas). Curiosamente, otros inhibidores de esta clase de proteasas como la Aprotinina y el PMSF no tuvieron efecto. Por otro lado, los inhibidores de cisteín, aspartíl y metalo-proteasas tampoco tuvieron efecto sobre la hidrólisis del sustrato L-BAPNA, indicando que la actividad identificada bajo nuestras condiciones experimentales, se trata de una serín-proteasa. Con el fin de ahondar en el entendimiento del papel que cumplen este tipo de enzimas en estos parásitos, se realizaron estudios del efecto del inhibidor de serín-proteasas TLCK (1μM, 100μM) sobre la proliferación y morfología de los promastigotes de L. seymouri. Las concentraciones utilizadas de este compuesto no tuvieron efecto; sin embargo, son necesarios más estudios con otros inhibidores de serín-proteasas, para establecer o no una relación directa entre la actividad identificada en la fracción soluble y la proliferación celular.