Cadherinas atípicas FAT1 y FAT4 actúan como supresores de tumores en el desarrollo y progresión del cáncer pancreático : ¿una posible interacción con la vía transduccional Hedgehog?

Abstract

El cáncer de páncreas es una de las patologías con mayor mortalidad, su incidencia en el mundo desarrollado ha aumentado paulatinamente y ha sido motivo de preocupación en contextos epidemiológicos. Debido a su tardío diagnóstico, la falta de sintomatología específica y un limitado tratamiento farmacológico y no farmacológico, se hace urgente el desarrollo de nuevas estrategias que garanticen un mejor abordaje del diagnóstico y comprensión de las bases moleculares y celulares de este tipo de cáncer. Recientemente la investigación ha estado centrada en la identificación de nuevas moléculas de adhesión celular que expliquen su posible papel en el desarrollo y progresión del cáncer de páncreas con el fin de optimizar el abordaje clínico y terapéutico. El estudio de la familia de las cadherinas atípicas FAT en otros tipos de cáncer humano ha demostrado una participación novedosa en la regulación del proceso canceroso y dentro de ellas se han identificado a las isoformas FAT1 y FAT4 como una de las mejores candidatas para explicar el comportamiento atípico entre distintos subclasificaciones del cáncer de páncreas y que podrían predecir la prognosis de la enfermedad. En este trabajo se evaluó la hipótesis que las proteínas FAT1 y FAT4 poseen un papel como supresores de tumores en el desarrollo del cáncer pancreático, regulando los procesos celulares de proliferación, adhesión, migración e invasión celular y si se relacionan a vías celulares morfogenéticas, entre ellas, la vía transduccional Hedgehog. Con este objetivo, se evaluó la función de estas proteínas in vitro mediante la creación de dos linajes knock out en una línea celular de cáncer pancreático utilizando el método de deleción genética CRISPR-Cas9. Los resultados demostraron que en la línea celular MIA-PaCa-2, las líneas celulares deficientes en FAT1 y/o FAT4 mostraron un perfil celular más agresivo que las células parentales. En los ensayos de proliferación, las células deficientes en FAT1 y FAT4 proliferaron sobre 1,5 veces frente al control parental en el mismo periodo de tiempo (72 h). En los ensayos de adhesión celular, la deleción respectiva del gen FAT1 o FAT4 indujo una cinética de adhesión 15 veces mayor en el intervalo de los tiempos 5 a 20 minutos y 1,4 veces a las 2 h en comparación con las células parentales. En los experimentos de wound-healing, para evaluar la capacidad de migración celular, las células knock out cerraron la herida más rápido y antes que las células control. Finalmente en los ensayos de invasión celular, las células KO para FAT1 y FAT4 presentaron una tasa 1,7 veces mayor de migración que las células control. Por último, para evaluar una posible relación entre la vía transduccional de FAT1 y/o FAT4 con la vía transduccional Hedgehog, se evaluó la abundancia relativa de las proteínas Gli1, SUFU, E-cadherina y ρ-ERK. Los resultados de los IWB no mostraron cambios en la expresión de ninguna de estas proteínas en células pancreáticas deficientes en FAT1 o FAT4, demostrando que no hay una relación entre ambas vías. Se concluye de esta forma que las cadherinas atípicas FAT1 y FAT4 actúan como supresores de tumores en el desarrollo y progresión del cáncer pancreático inhibiendo la proliferación, adhesión, migración e invasión celular. Este trabajo aporta nueva evidencia a nivel celular y molecular de los mecanismos involucrados en la génesis y desarrollo tumoral en el cáncer pancreático y que FAT1 y FAT4 pueden ser utilizados como biomarcadores para evaluar la prognosis de esta enfermedad.