Validación de la medición de retinol y tocoferol por HPLC en muestras tomadas en gotas de sangre sobre papel filtro (GSS) y su comparación con sangre venosa y sangre capilar

Abstract

Los valores séricos son el indicador comúnmente usado para conocer el estado de vitaminas A y E. Desafortunadamente, su uso es impráctico en evaluaciones poblacionales, debido a que involucra la toma de sangre venosa, centrifugación y almacenamiento en congelación antes de su análisis. El objetivo de este estudio fue validar el uso de gotas de sangre seca (GSS) para la evaluación de vitaminas A y E, comparándolas con el retinol y tocoferol en suero venoso y capilar. Muestras de sangre venosa (SV) y capilar (SC) y GSS capilar (GSSC) se tomaron simultáneamente de 27 donadores adultos sanos. Las muestras de sangre, tanto de GSS como de suero, se prepararon y se mantuvieron a 70ºC hasta su análisis por HPLC. Las diferencias entre las muestras individuales fueron calculadas por análisis de varianza (ANOVA). El Coeficiente de Correlación de Pearson se calculó para estimar el grado de varianza de las concentraciones tanto de retinol como de tocoferol de las diferentes muestras. Las correlaciones para retinol fueron: SV/SC = 0.89; SV/GSSC = 0.85 y SC/GSSC = 0.88; para tocoferol fueron: SV/SC = 0.97; SV/GSSC = 0.94 y SC/GSSC = 0.96. El uso de esta nueva forma de muestra para evaluación de vitaminas A y E permitirá el acceso a poblaciones previamente inaccesibles.

The most commonly used indicator to know about vitamins A and E status is serum values. Unfortunately, its use is impractical for national surveys because it involves collection of venous blood, centrifugation and frozen storage before analysis. The objective of this study was to validate the use of dried blood spots (DBS) for vitamin A and E assessment by comparing it with venous and capillary serum retinol and tocopherol. Venous (VB), capillary blood (CB) and capillary DBS (CDBS) specimens were obtained simultaneously from 27 healthy adult volunteers. From each blood specimen, both DBS and liquid serum were prepared, and maintained at 70ºC until HPLC analysis. The differences within individuals were estimated by analysis of variance (ANOVA). The R2 value (Square of the Pearson!s correlation coefficient was calculated to estimate the degree of variance for one retinol or tocopherol concentration explained by the other. Correlations for retinol were: VB/CB = 0.89; VB/CDBS = 0.85 and CB/CDBS = 0.88; for tocopherol were: VB/CB = 0.97; VB/CDBS = 0.94 and CB/CDBS = 0.96. The use of this new sample matrix for vitamin A and E assessment will allow access to previously unavailable populations.