Eficacia de un ensayo enzimatico de un ELISA estandarizado con antígenos de excreción-secreción de tripomastigotes de una cepa peruana de Trypanosoma cruzi y Chagatest ELISA recombinante para la detección de anticuerpos IgG

Abstract

La enfermedad de Chagas es un problema de Salud pública que afecta a millones de personas sobre todo en América Latina. Diversos preparados antigénicos han sido utilizados con la finalidad de mejorar las técnicas de diagnóstico; sin embargo, aún no se ha creado una técnica “Gold Standard” para el diagnóstico serológico que nos garantice un 100% de sensibilidad y 100% de especificidad. Los antígenos de excreción-secreción de tripomastigotes han mostrado un excelente rendimiento en ELISA y Western blot, por lo expuesto, y con la finalidad de seguir aportando mejoras al diagnóstico serológico de la enfermedad de Chagas la presente investigación tiene como objetivo comparar la eficacia de la técnica de ELISA utilizando antígenos de excreción y secreción de tripomastigotes (TESA) de una cepa peruana y un Chagatest ELISA recombinante. Para obtener las proteínas TESA se realizaron cultivos axénicos de epimastigotes de la cepa peruana en medio bifásico (BHI/PYLB) suplementado con sangre desfibrada de conejo 10% + antibiótico amikacina 500mg/ml (0,001%) dejando incubar por 15 días, luego se adiciono medio Grace´s modificado el cual induce la transformación a tripomastigotes; finalmente, se agregó Minimum Essential Medium a la biomasa formada para la producción de antígenos de excreción-secreción. Las proteínas TESA se enfrentaron con 45 sueros positivos a la enfermedad de Chagas, 20 sueros negativos y 22 sueros positivos a otras parasitosis obteniendo una sensibilidad de 97.78% y especificidad de 59.52%.Se utilizaron los mismos sueros controles para el ensayo con el kit de Chagatest ELISA recombinante obteniendo una sensibilidad de 66.76% y especificidad de 95.83%.