Introduction. Water contamination with antibiotic-resistant bacteria has become a global problem and continues to grow due to the evolution of these microorganisms. Most waterborne diseases are caused by microorganisms found in water bodies, contaminated with human or animal feces. Objective. Identify the antimicrobial susceptibility profile of clinically relevant bacteria isolated from the Guamote River, located in an agricultural area of ​​the Ecuadorian Andes. Methodology. A descriptive study was conducted with a non-experimental field design, quantitative and transversal approach. It began with the collection of water samples in six different geographical points, to proceed with the measurement of pH, environmental and water temperature. Bacterial isolation and identification were performed by conventional tests using culture media together with biochemical tests. The antibiotic resistance profile was determined by the agar disc diffusion method. Results. Bacteria belonging to the order Enterobacterales (Citrobacter freundii, Citrobacter amalonaticus, Enterobacter cloacae, Proteus vulgaris, Klebsiella oxytoca), (2/15) 13.30 % corresponding to the Aeromonadaceae family and (1/15) 6.70 % to Enterococcus faecalis were identified (12/15) 80.0 %. Most of the Enterobacteriaceae showed resistance to amoxacillin, amoxacillin/clavulanic acid, aztreonam, kanamycin, colistin, tetracyclines, and trimethoprim sulfamethoxazole and intermediate sensitivity to imipenem. The strains of Aeromonas sp showed resistance to amoxacillin and intermediate sensitivity to imipemem. Conclusion. There is contamination of the water of the Guamote river basin by Enterobacterales, Aeromonas sp and E. faecalis; with resistance to antibiotics of clinical use.Introducción: La contaminación del agua con bacterias resistentes a los antibióticos se ha convertido en un problema mundial y sigue en crecimiento debido a la evolución de estos microorganismos. La mayoría de las enfermedades transmitidas por el agua son causadas por microorganismos encontrados en cuerpos hídricos, contaminados con heces humanas o animales. Objetivo: Identificar el perfil de susceptibilidad antimicrobiana de bacterias de relevancia clínica aisladas del río Guamote, situado en una zona agropecuaria de Los Andes ecuatorianos. Metodología.  Se realizó un estudio descriptivo, con diseño de campo no experimental, enfoque cuantitativo y transversal. Se inició con la recolección de muestras de agua en seis puntos geográficos diferentes, para proceder con la medición de pH, temperatura del ambiente y agua. El aislamiento e identificación de las bacterias se realizó por medio de pruebas convencionales, empleando medios de cultivo juntamente con pruebas bioquímicas. El perfil de resistencia a los antibióticos se determinó por el método de difusión del disco en agar. Resultados: Se identificaron (12/15) 80,0 % bacterias pertenecientes al orden    Enterobacterales (Citrobacter freundii, Citrobacter amalonaticus, Enterobacter cloacae, Proteus vulgaris, Klebsiella oxytoca), (2/15) 13.30 % correspondiente a la familia Aeromonadaceae y (1/15) 6,70 % a Enterococcus faecalis. La mayoría de los Enterobacterales presentaron resistencia a amoxacilina, amoxacilina /ácido clavulánico, aztreonam, kanamicina, colistín, tetraciclinas, y trimetoprim sulfametoxazol y sensiblidad intermedia a imipenem. Las cepas de Aeromonas spp. mostraron resistencia a amoxacilina y sensibilidad intermedia a imipemem. Conclusión: Existe contaminación del agua de la cuenca del río Guamote por Enterobacterales, Aeromonas sp y E. faecalis; con resistencia a antibióticos de uso clínico. Área de estudio general: Laboratorio Clínico. Área de estudio específica: Microbiología. Tipo de estudio:  Artículo original.