La resistencia antimicrobiana causada por miembros de la familia Enterobacteriaceae productoras de β-lactamasas de espectro extendido (BLEE) constituyen un problema de salud pública a nivel mundial. Las BLEE son enzimas que confieren resistencia a penicilinas y cefalosporinas de primera, segunda, tercera y cuarta generación, mismas que se expresan en mayor proporción en bacterias gramnegativas. Objetivo: Caracterizar enterobacterias productoras de BLEE en hemocultivos de pacientes atendidos en diferentes áreas del Hospital General Isidro Ayora de Loja, periodo 2019-2020. Materiales y métodos: Estudio documental cuantitativo, descriptivo, transversal. La muestra estuvo constituida por 114 aislamientos. Resultados:  Las variables más frecuentes del estudio fueron, sexo femenino (54,4%), grupo etario adulto (39,5%) con edad media de 45 años. Las especies bacterianas prevalentes fueron Klebsiella spp., (43,9%) y Escherichia. coli (39,5%), seguidas de Enterobacter spp., (6,1%), Salmonella spp., (3,5%), Citrobacter freundii (2,6%), Proteus mirabilis (1,8%), Morganella morganii (1,8%) y Serratia marcescens (0,9%). Según la susceptibilidad antimicrobiana, existió alta resistencia a todos los betalactámicos probados, mientras que a los aminoglucósidos, fluoroquinolonas y carbapenémicos presentaron sensibilidad. Las especies predominantes fueron Klebsiella spp., en Hospitalización y Escherichia coli en Emergencia. De todas las especies Klebsiella spp., y Escherichia coli son BLEE (32,5%). Conclusiones: La resistencia a los antimicrobianos causada por Enterobacterias productoras de BLEE se considera un problema de salud grave. Por ello, es importante evaluar y establecer medidas de prevención, control y difusión de las BLEE para reducir la farmacorresistencia y proporcionar un tratamiento eficaz.Antimicrobial resistance caused by extended-spectrum β-lactamase (ESBL)-producing members of the Enterobacteriaceae family is a global public health problem. ESBLs are enzymes that confer resistance to first, second, third and fourth generation penicillins and cephalosporins, which are expressed in greater proportion in gram-negative bacteria. Objective: To characterize ESBL-producing Enterobacteriaceae in blood cultures of patients treated in different areas of the Isidro Ayora General Hospital in Loja, period 2019-2020. Materials and methods: Quantitative, descriptive, cross-sectional documentary study. The sample consisted of 114 isolates. Results: The most frequent variables of the study were female sex (54.4%), adult age group (39.5%) with a mean age of 45 years. The prevalent bacterial species were Klebsiella spp., (43.9%) and Escherichia. coli (39.5%), followed by Enterobacter spp., (6.1%), Salmonella spp., (3.5%), Citrobacter freundii (2.6%), Proteus mirabilis (1.8%), Morganella morganii (1.8%) and Serratia marcescens (0.9%). According to antimicrobial susceptibility, there was high resistance to all tested beta-lactams, while sensitivity to aminoglycosides, fluoroquinolones and carbapenems was present. The predominant species were Klebsiella spp., in Hospitalization and Escherichia coli in Emergency. Of all the species Klebsiella spp., and Escherichia coli are ESBL (32.5%). Conclusions: Antimicrobial resistance caused by ESBL-producing Enterobacteriaceae is considered a serious health problem. Therefore, it is important to evaluate and establish ESBL prevention, control, and dissemination measures to reduce drug resistance and provide effective treatment.