Chlorpyrifos (CP) is an organophosphate insecticide widely used for control agricultural and household pests. The main damage caused by the CP is the neurotoxicity induced by inhibition of the enzyme acetylcholinesterase, which causes an increase in the neurotransmitter acetylcholine and promotes hiperexitação the central nervous system and muscle junctions, leading to disruption of physiologic function. Occupational exposure is a major form of human poisoning by organophosphates and current therapies for these compounds are not fully efficient. In this sense the search for compounds that can reverse this damage has intensified and some studies have focused their efforts on plants protection purposes or natural compounds in various neuropathological conditions. Psidium guajava is a plant widely used in popular medicine and its antioxidant activity was described in Brazil leaves and fruit are used for anorexia, cholera, diarrhea, digestive problems, dysentery, gastric insufficiency, inflammation of mucous membranes, laryngitis, skin problems, neck pain, ulcers, among others. In this study we evaluated the antioxidant and protective potential of the hydroalcoholic extract of P. guajava (HEPG) against CP induced toxicity in the fruit fly Drosophila melanogaster. HEPG in vitro antioxidant activity was confirmed by ABTS, DPPH, Total Phenolics and FRAP assays. The exposure of flies to CP caused increased mortality, locomotor deficits and inhibition of acetylcholinesterase. Flies exposed to CP presented elevated ROS and lipid peroxidation which was accompanied by a significant decrease in mitochondrial viability. As a response to increased oxidative stress, CP exposed flies showed increased in GST activity and GSH levels. The mRNA expression of NRF2 and MPK2 (which encodes D. melanogaster p38MAPK) were also significantly up-regulated. HEPG was able to restore all the damage and biochemical/molecular alterations caused by CP. Our results show for the first time the potential of P. guajava protective effect against the toxicity caused by Chlorpyrifos, suggesting Psidium guajava as an adjunct alternative treatment for poisoning by organophosphorus compounds.Clorpirifós (CP) é um inseticida organofosforado amplamente utilizado no controle de pragas agrícolas e domésticas. O principal dano causado pelo CP é a neurotoxicidade induzida pela inibição da enzima acetilcolinesterase, o que ocasiona um aumento no neurotransmissor acetilcolina e promove uma hiperexitação no sistema nervoso central e junções musculares, levando a perturbações do funcionamento fisiológico. A exposição ocupacional é uma das principais formas de intoxicação humana por organofosforados e as terapias atuais para estes compostos não são totalmente eficientes. Nesse sentido a procura por compostos capazes de reverter esses danos tem se intensificado e alguns estudos têm focado seus esforços sobre os efeitos de proteção de plantas ou compostos naturais em várias condições neuropatológicas. Psidium guajava é uma planta amplamente utilizada na medicina popular e a sua atividade antioxidante foi descrita, no Brasil as folhas e os frutos são utilizados para a anorexia, cólera, diarréia, problemas digestivos, disenteria, insuficiência gástrica, inflamação das membranas mucosas, laringite, problemas de pele, dor de garganta, úlceras, entre outros. Neste estudo foi avaliado o potencial antioxidante e protetor do extrato hidroalcoólico de P. guajava (HEPG) contra a toxicidade induzida por CP na mosca da fruta Drosophila melanogaster. A atividade antioxidante de HEPG in vitro foi confirmada pelos ensaios de ABTS, DPPH, fenóis totais e FRAP. A exposição das moscas ao CP causou aumento da mortalidade, deficiências locomotoras e inibição da acetilcolinesterase. Moscas expostas ao CP apresentaram aumento de ROS e peroxidação lipídica, acompanhado por uma diminuição significativa na viabilidade mitocondrial. Como resposta ao aumento do estresse oxidativo, moscas expostas ao CP mostraram aumento da atividade da GST e nos níveis de GSH. A expressão de mRNA de NRF2 e MPK2 (que codifica p38MAPK em D. melanogaster) também foram significativamente super regulados. HEPG foi capaz de restaurar todos os danos e alterações bioquímicas/moleculares causados pelo CP. Os nossos resultados mostram pela primeira vez o potencial efeito protetor de P. guajava contra a toxicidade causada por clorpirifós, sugerindo a Psidium guajava como um tratamento alternativo adjunto para o envenenamento por compostos organofosforados.