Características dos genótipos e subgenótipos do vírus da hepatite b em portadores crônicos do estado de Rondônia
Registro en:
GOMES, Sandra Rosa Lima. Características dos genótipos e subgenótipos do vírus da hepatite b em portadores crônicos do estado de Rondônia. 2017. 98 f. Dissertação (Mestrado) - Programa de Pós-Graduação em Biologia Experimental, Fundação Universidade Federal de Rondônia, Porto Velho, 2017.
Autor
Gomes, Sandra Rosa Lima
Salcedo, Juan Miguel Villa lobos
Dall A’cqua, Deusilene Souza Vieira
Institución
Resumen
Dissertação apresentada ao Programa de Pós-
Graduação em Biologia Experimental –
PGBIOEXP – do Núcleo de Saúde da
Universidade Federal de Rondônia para a
obtenção do título de mestre.
Orientador: Dr. Juan Miguel
VillalobosSalcedo
Co-orientadora: Dra. Deusilene Souza Vieira
DallA’cqua A infecção pelo vírus da hepatite B (HBV) é um problema de saúde global, com
prevalência de 400 milhões de pessoas afetadas e pelo menos 1 milhão de mortes por
ano. O HBV é um vírus hepatotrópico pertencente à família Hepadnaviridae e gênero
Orthohepadnavirus.Seu genoma é composto por uma molécula de DNA circular
parcialmente duplicada, com aproximadamente 3.200 pares de base e quatro regiões
sobrepostas de leitura aberta. Clinicamente, o HBV pode manifestar-se em hepatite
aguda ou crônica com progressão da doença principalmente para cirrose e
hepatocarcinoma (HCC). O HBV possui uma ampla diversidade genética e é
classificado em dez genótipos, designados de A a J, de acordo com a variabilidade das
suas sequências, com distribuições geográficas distintas. Os genótipos do HBV podem
influenciar nas características clínicas da doença e na resposta ao tratamento, assim
como a presença de recombinantes inter ou intra-genotípicos e mutantes virais. O
objetivo desse estudo é caracterizar os genótipos e subgenótipos do HBV, possíveis
recombinantes e variantes virais em portadores crônicos do estado de Rondônia. Nesta
proposta foram analisadas 40 amostras de soro de pacientes crônicos do HBV coletadas
no ambulatório de hepatites virais do Centro de Pesquisa em Medicina Tropical de
Rondônia (CEPEM). As amostras incluídas neste estudo foram submetidas à extração
de DNA e posteriormente à amplificação molecular por PCR de dois fragmentos dos
genes S, P, C e X de 1.500 e 1.700 pb. Os produtos amplificados foram purificados e
submetidos ao sequenciamento. A genotipagem viral foi realizada utilizando o
programa MEGA 7.0 e a análise para a detecção de sequências virais recombinantes foi
realizada com os programas SplitsTree4 e RDP4. A amplificação molecular foi possível
de ser realizada para 17 casos. A presença do fragmento maior foi observada para 17
amostras, enquanto para o fragmento menor em 7 amostras. Um total de 12 sequências
foram obtidas no sequenciamento de DNA. Foram encontrados a presença dos
genótipos A, D e F na população estudada. A genotipagem das amostras mostrou uma
maior frequência do genótipo A (50%; 6/12), seguido do genótipo D (33,4%; 4/12) e F
(16,6%; 2/12). Dentro do genótipo A, o subgenótipo mais prevalente foi o A1 (83,4%;
5/6) e no D o D3 (50%; 2/4), enquanto para o genótipo F o único subgenótipo
encontrado foi o F2. Na análise de mutações no genoma do HBV foram encontradas 10
substituições de nucleotídeos no gene C, 5 substituições de aminoácidos no gene S e 3
substituições de nucleotídeos no gene X. As alterações clínicas associadas à presença
das substituições encontradas nesta análise incluem a redução ou ausência da secreção
de HBeAg, progressão da hepatite B crônica para hepatocarcinoma e escape
imunológico. Os dados obtidos nesse estudo refletem a diversidade genética do vírus da
hepatite B, observada principalmente pela presença de variantes virais na população de
Rondônia.