Dissertation
Isolamento e caracterização de células-tronco mesenquimais derivadas do tecido adiposo de Chlorocebus aethiops.
Registro en:
MIRANDA, Carla Maria Figueiredo de Carvalho. Isolamento e caracterização de células-tronco mesenquimais derivadas do tecido adiposo de Chlorocebus aethiops. Orientadora: Érika Renata Branco. 2013. 74 f. Dissertação (Mestrado em Saúde e Produção Animal na Amazônia) - Universidade Federal Rural da Amazônia, Belém, 2013.
CDD: 571.1
repositorio.ufra.edu.br/jspui/handle/123456789/721
Autor
MIRANDA, Carla Maria Figueiredo de Carvalho
Institución
Resumen
Ministério da Educação e Universidade Federal Rural da Amazônia As células-tronco mesenquimais (CTM) são células raras, indiferenciadas, possuindo alto
potencial de auto-renovação, proliferação e diferenciação. Tal plasticidade poderia
possibilitar a utilização destas células na medicina regenerativa. Assim, objetivou- se isolar,
caracterizar e diferenciar CTM derivadas do tecido adiposo subcutâneo de Chlorocebus
aethiops. As CTM foram isoladas por digestão enzimática com colagenase tipo I e
cultivadas in vitro até a passagem 4 em Dulbecco's Modified Eagle's Médium,
suplementado com 10% de soro fetal bovino. Foi realizada curva de crescimento celular e,
posteriormente, avaliação quanto à presença de senescência, por meio da atividade da
enzima P-galactosidase, e integridade cromossômica. As células foram caracterizadas
mediante a marcação de receptores de superfície específicos para CTM e também para a
ausência de marcadores exclusivos de células hematopoiéticas. A diferenciação em
adipócitos, osteócitos e condrócitos foi induzida in vitro, sendo avaliada após coloração
específica. Os resultados mostraram que CTM de tecido adiposo de C. aethiops têm a
capacidade de expandir em cultura, proliferando-se em formato fibroblastóide ao longo das
passagens. Foi observado percentual de células senescentes (12,5%), porém sem alteração
cromossômica. As células apresentaram positividade para marcadores específicos de CTM e
potencial de diferenciação em linhagens mesodérmicas, comprovando a multipotência de
CTM derivados do tecido adiposo de C. aethiops. The mesenchymal stem cells (MSCs) are rare and undifferentiated cells, possess high
potential for self-renewal, proliferation and differentiation. This plasticity could allow the
use of such cells in regenerative medicine. The objective was to isolate, characterize and
differentiate Chlorocebus aethiops adipose tissue-derived MSCs. MSCs were isolated by
enzymatic digestion using type I collagenase and in vitro cultured until passage 4 in
Dulbecco's Modified Eagle's Médium supplemented with 10% fetal bovine serum. It was
performed cell growth curve and, subsequently evaluation for senescence, through the
activity of the enzime P-galactosidase, and chromosomal integrity. Cells were characterized
by presence of surface receptors for MSCs and also to the absence of specific markers of
hematopoietic cells. The differentiation into adipocytes, chondrocytes and osteocytes was
induced in vitro and was assessed by specific staining. The results demonstrated that C.
aethiops adipose-derived MSCs have the ability to expand in culture, proliferating
fibroblastoid-shaped along the passages. It was observed percentage of senescent cells
(12.5%), but without chromosomal alteration. The cells were positive for specific markers of
MSCs and demonstrated mesodermal lineages differentiation potential, proving the
multipotency of C. aethiops adipose tissue- derived MSCs.