A Covid-19 é uma doença causada pelo beta-coronavírus de origem zoonótica SARS-CoV-2 e que desde o final de 2019 ocasiona a pandemia ainda hoje persistente; seu período de evolução varia em torno de 14 dias e seus sintomas são geralmente brandos, entretanto cerca de 14% podem desenvolver complicações severas e por sua fácil forma de transmissão sobrecarrega os sistemas de saúde colapsando-o em determinadas etapas da curva epidemiológica eventualmente. O presente artigo de revisão bibliográfica aborda em sua ênfase diversos fatores que afetam a acurácia do teste considerado “padrão ouro” Rt PCR para diagnóstico da Covid-19, em especial aos fatores analíticos em suas diversas etapas (Pré-analíticos, analíticos e pós analíticos), que proporcionam o aparecimento de resultados falso-positivos e falso-negativos principalmente; desta forma um diagnóstico com o máximo de precisão e exatidão é de extrema importância no combate e controle da situação pandêmica atual. Foi realizado um estudo descritivo transversal exploratório nas bases de dados, a partir disso foram incluídos artigos obtidos na íntegra em língua nacional ou estrangeira e excluídos resumos, editoriais, opiniões ou artigos não obtidos integralmente. Através das bases de literatura científica (Pubmed, BVS/LILACS, Science Direct, Chocrane Library), foram identificados 213 artigos e destes através das etapas de seleção, elegibilidade e ao fim das análises na etapa de seleção, foram selecionadas 7 publicações, por atenderem os critérios de inclusão. Variações na sequência do material genético viral (mutações), a qualidade do kit laboratorial utilizado, a prática laboratorial dos profissionais envolvidos no exame, a estrutura física do laboratório, realização dos procedimentos técnicos e de segurança, transporte e armazenamento, o curso da doença no paciente, carga viral nas diferentes áreas a serem coletadas, o tipo de coleta a ser realizada e todas as variáveis identificadas nas fases analíticas; são variáveis que interferem na acurácia do teste, sendo que o período da coleta no curso da doença, carga viral em diferentes regiões do organismo e o tipo de coleta e técnica, os fatores mais preponderantes para o surgimento de tais interferentes.