Cryptococcus laurentii is a fungus distributed in different environments, where individuals come into contact with it, become colonized and develop infections that vary according to their immune status. This species is considered emerging, and for its  laboratory identification specialized technical knowledge is required, as well asspecific laboratory tests that are not always available. The objective was to describe the phenotypic characteristics of in vitro C. laurentii complexes in culture media that are routinely used in microbiology laboratories. We studied isolates of C. laurentii complex, C. neoformans, C. albidus and Candida albicans, in the evaluation of in vitro tests: growth in different culture media (Candida chromogen, chocolate agar, blood agar, EMB agar, MacConkey agar, SS agar and Mycosel®); melanin production in niger seed agar, growth at 37ºC, assessment of growth atmosphere, analysis of cell micromorphology, catalase, urease, beta-glucosidase, gelatinase, phospholipase, proteinase, DNase, amylase, hemolytic activity, and susceptibility testing to antifungals. The results show that strict aerobes are different: for C. neoformans, no pigment was produced on niger seed agar, and all isolates of C. laurentii were catalase-positive, and had amylase activity. Halos around the antifungal disks ranged between 14 and 35 mm for amphotericin B, 31-40 mm for voriconazole and 13-28 mm for fluconazole. We conclude that C. laurentii grows in different culture media, with morphocolonial features, aspects, borders and various colors, like other species of yeast, so classical tests for identification are required. Alongside the typing tests, exoenzymes and in vitro susceptibility to antifungal agents may be useful in the differentiation of isolates.Cryptococcus laurentii é um fungo distribuído em diversos ambientes, e eventualmente causa infecção no homem. Por ser uma espécie considerada emergente, requer, para sua identificação laboratorial, um conhecimento técnico mais especializado, provas ou testes laboratoriais específicos, que nem sempre estão disponíveis. O objetivo deste trabalho foi descrever características fenotípicas in vitro de isolados do complexo C. laurentii, em meios de cultura utilizados na rotina de laboratório de microbiologia. Foram estudados isolados do complexo C. laurentii em diferentes meios de cultura e condições. A avaliação in vitro foi feita através de crescimento nos meios: ágar cromogênico Candida, ágar chocolate, ágar sangue, ágar EMB, ágar MacConkey, ágar SS e ágar Mycosel; produção de melanina em ágar Níger, crescimento a 37ºC, avaliação da atmosfera de crescimento, análise da micromorfologia celular, catalase, urease, beta-glicosidase, gelatinase, fosfolipase, proteinase, DNase, amilase, atividade hemolítica e teste de sensibilidade aos antifúngicos. O crescimento dos isolados de C. laurentii em caldo tioglicolato ocorreu somente na superfície do meio; apresentaram crescimento em ágar MacConkey e não cresceram em Mycosel®; apresentaram crescimento variável em temperatura de 37ºC, não produziram melanina em ágar níger, foram catalase, esculina e amilase positivas; atividades de fosfolipase e proteinase foram negativas e atividade hemolítica variável. Os halos ao redor dos discos de antifúngicos variaram de 14 a 35 mm para anfotericina B, de 31 a 40 mm para voriconazol, de 13 a 28 mm para fluconazol. Conclui-se que C. laurentii cresce em diferentes meios de cultura, com características morfocoloniais, aspectos, bordas e colorações diversas, como outras espécies de leveduras, de modo que provas clássicas para identificação são necessárias. Testes de tipagem, incluindo exoenzimas e sensibilidade in vitro aos antifúngicos podem ser úteis na diferenciação dos isolados.