dc.contributor | Silva, Neide Maria da | |
dc.contributor | http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4703578Z1 | |
dc.contributor | Ferro, Eloisa Amália Vieira | |
dc.contributor | http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4784232Z5 | |
dc.contributor | Mineo, Jose Roberto | |
dc.contributor | http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4780327P9 | |
dc.contributor | Silva, Deise Aparecida de Oliveira | |
dc.contributor | http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4701157D0 | |
dc.contributor | Martins Filho, Olindo Assis | |
dc.contributor | http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4785619H4 | |
dc.contributor | Faria, Míriam Rubio | |
dc.creator | Barbosa, Bellisa de Freitas | |
dc.date | 2016-06-22T18:46:19Z | |
dc.date | 2012-03-07 | |
dc.date | 2016-06-22T18:46:19Z | |
dc.date | 2011-11-30 | |
dc.date.accessioned | 2023-09-28T21:23:10Z | |
dc.date.available | 2023-09-28T21:23:10Z | |
dc.identifier | BARBOSA, Bellisa de Freitas. Influência das citocinas IL-10, TGF-β1 e IFN-γ na susceptibilidade de células
trofoblásticas humanas (linhagem BeWo) e células epiteliais uterinas humanas
(linhagem HeLa) à infecção por Toxoplasma gondii: papel na expressão de ICAM-1, na
adesão do parasito à célula hospedeira e vias de sinalização intracelulares ativadas. 2011. 146 f. Tese (Doutorado em Ciências Biológicas) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2011. | |
dc.identifier | https://repositorio.ufu.br/handle/123456789/16572 | |
dc.identifier.uri | https://repositorioslatinoamericanos.uchile.cl/handle/2250/9068848 | |
dc.description | Toxoplasma gondii is a parasite able to infect various cell types, including trophoblast cells.
Studies demonstrated that interleukin (IL)-10, transforming growth factor (TGF)-β1 and
interferon (IFN)-γ are cytokines involved in the susceptibility of BeWo trophoblast cells and
cervical uterine cells (HeLa lineage) to T. gondii infection. Furthermore, T. gondii is able to
adhere to the plasma membrane of host cells through intercellular adhesion molecule 1
(ICAM-1). The present study investigated two major aims: (i) the role of IL-10, TGF-β1 and
IFN-γ in the expression of ICAM-1 in BeWo and HeLa cells and the adhesion of T. gondii to
these cells under the influence of these cytokines; and (ii) the intracellular mechanisms
triggered by IL-10, TGF-β1 and IFN-γ in BeWo and HeLa cells in the differential
susceptibility of these cells to infection. In order to perform the first aim, BeWo and HeLa
cells were infected or not by T. gondii (RH strain) and treated or not with rIL-10, rTGF-β1 or
rIFN-γ. The cells were analyzed for the infection index, ICAM-1 expression, tumor necrosis
factor (TNF)-α release, and for influence of ICAM-1 in the adhesion of the parasite to the host
cells in the presence or absence of anti-ICAM-1 antibody. Additionally, to verify the second
aim, BeWo and HeLa cells were treated or not with rIL-10, rTGF-β1 or rIFN-γ, infected or
not by T. gondii (2F1 or RH strain), and analyzed for T. gondii proliferation index, cytokines
production, phosphorylation of signal transducers and activators of transcription (STAT)-1,
STAT-3, Smad2/3 and interferon regulatory factor (IRF)-1 expression, as well as the effect of
the inhibition of these intracellular pathways in the proliferation of T. gondii. For the BeWo
cells, rIL-10 and rTGF-β1 favored susceptibility to infection, but only rTGF-β1 and rIFN-γ
promoted an increase of ICAM-1 expression, TNF-α release, the number of ICAM-1+ cells
with membrane-adhered parasites and the total number of membrane adhered-parasites in
ICAM-1+ cells. On the other hand, rTGF-β1 and rIFN-γ downregulated the expression of
ICAM-1 triggered by T. gondii in HeLa cells, leading to control of the infection. In contrast to
HeLa cells, T. gondii proliferation index was increased in BeWo cells treated with rIL-10 and
rTGF-β1, while rIFN-γ was unable to control it. The parasite proliferation regulated by rIFN-γ
and rIL-10 in BeWo and HeLa cells was associated with the high phosphorylation of STAT-1
and IRF-1 expression in HeLa cells and the activation of STAT-3 in BeWo cells. The
influence of these intracellular pathways in the parasite proliferation was confirmed when
STAT-1 or STAT-3 inhibitors were used to revert the effectors mechanisms of the parasite
regulation induced by rIFN-γ and rIL-10. In relation to cytokine production, HeLa cells
produced higher concentrations of MIF if compared to BeWo cells, while BeWo cells secreted higher concentrations of IL-6 when compared to HeLa cells. Taken together, these
data conclude that IL-10, TGF-β1 or IFN-γ cytokines regulate the susceptibility of BeWo and
HeLa cells to T. gondii infection when differentially modulate ICAM-1 expression and trigger
distinct intracellular pathways, contributing to the understanding of this particular strategy
used by T. gondii to adhere and invade trophoblast cells and the intracellular effects of some
cytokines responsible to the higher susceptibility of trophoblast cells to infection. | |
dc.description | Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico | |
dc.description | Doutor em Imunologia e Parasitologia Aplicadas | |
dc.description | Toxoplasma gondii é um protozoário parasito intracelular obrigatório capaz de infectar uma
diversidade de células, incluindo células trofoblásticas. Estudos prévios demonstraram que
interleucina (IL)-10, fator transformador de crescimento (TGF)-β1 e interferon (IFN)-γ são
importantes citocinas envolvidas na susceptibilidade de células trofoblásticas humanas
(linhagem BeWo) e células epiteliais uterinas humanas (linhagem HeLa) à infecção por T.
gondii. Adicionalmente, T. gondii é capaz de aderir à membrana plasmática de células
hospedeiras através da molécula de adesão intercelular tipo 1 (ICAM-1). O presente estudo
investigou dois objetivos gerais: (i) verificar o papel de IL-10, TGF-β1 e IFN-γ na expressão
de ICAM-1 em células BeWo e HeLa, bem como analisar a influência de ICAM-1 na adesão
de T. gondii a estas células quando tratadas ou não com as mesmas citocinas; e (ii) verificar os
mecanismos intracelulares ativados por IL-10, TGF-β1 e IFN-γ em células BeWo e HeLa no
intuito de compreender os efeitos diferenciais exercidos por essas citocinas nessas distintas
linhagens celulares. Para executar o primeiro objetivo, células BeWo e HeLa foram infectadas
por T. gondii (cepa RH) e tratadas com rIL-10, rTGF-β1 ou rIFN-γ. As células foram
analisadas quanto ao índice de infecção, expressão de ICAM-1, produção de fator de necrose
tumoral (TNF)-α e quanto ao papel de ICAM-1 na adesão de T. gondii às células na presença
ou ausência de anticorpo neutralizante específico anti-ICAM-1. Para desenvolver o segundo
objetivo, células BeWo e HeLa foram tratadas com rIL-10, rTGF-β1 ou rIFN-γ, infectadas por
T. gondii (cepa 2F1 ou RH) e analisadas quanto ao índice de proliferação intracelular do
parasito, à produção de citocinas, à fosforilação dos transdutores de sinais e ativadores de
transcrição (STAT)-1, STAT-3 e Smad2/3, à expressão do fator regulador de interferon (IRF)-
1, bem como o efeito da inibição destas vias intracelulares na proliferação de T. gondii. Nas
células BeWo, rIL-10 e rTGF-β1 induziram aumento do índice de infecção, mas apenas
rTGF-β1 e rIFN-γ promoveram aumento da expressão de ICAM-1, da produção de TNF-α, do
número de células ICAM-1+ com parasitos aderidos à membrana e do número total de
parasitos aderidos à membrana em células ICAM-1+. Por outro lado, rTGF-β1 e rIFN-γ
reduziram a expressão de ICAM-1 induzida por T. gondii em células HeLa, direcionando a
uma menor susceptibilidade destas células à infecção. E, contrariamente ao observado para
células HeLa, o índice de proliferação intracelular de T. gondii foi aumentado em células
BeWo tratadas com rIL-10 e rTGF-β1, enquanto que rIFN-γ foi incapaz de controlar este
índice nestas células. A proliferação do parasito regulada por rIFN-γ e rIL-10 em células
BeWo e HeLa esteve relacionada a maior fosforilação de STAT-1 e expressão de IRF-1 em células HeLa e a fosforilação de STAT-3 em células BeWo. A influência dessas vias
intracelulares na proliferação de T. gondii foi confirmada quando os inibidores de STAT-1 e
STAT-3 foram usados, revertendo os mecanismos efetores de regulação do parasitismo
induzidos por rIFN-γ e rIL-10. Quanto à produção de citocinas, células HeLa secretaram
maiores concentrações de MIF se comparado às células BeWo, enquanto que células BeWo
produziram maiores quantidades de IL-6 em comparação com células HeLa. Portanto, esses
dados coletivamente demonstraram que IL-10, TGF-β1 e IFN-γ induziram susceptibilidades
diferentes à infecção por T. gondii em células BeWo e HeLa ao modularem distintamente a
expressão de ICAM-1 e as vias de sinalização intracelulares, contribuindo assim no
entendimento de alguns dos mecanismos usados por T. gondii para se estabelecer em células
trofoblásticas humanas e os possíveis efeitos intracelulares de algumas citocinas antiinflamatórias
e pró-inflamatórias responsáveis pela maior susceptibilidade de células
trofoblásticas à infecção. | |
dc.format | application/pdf | |
dc.format | application/pdf | |
dc.language | por | |
dc.publisher | Universidade Federal de Uberlândia | |
dc.publisher | BR | |
dc.publisher | Programa de Pós-graduação em Imunologia e Parasitologia Aplicadas | |
dc.publisher | Ciências Biológicas | |
dc.publisher | UFU | |
dc.rights | Acesso Aberto | |
dc.subject | Células trofoblásticas BeWo | |
dc.subject | Células HeLa | |
dc.subject | Toxoplasma gondii | |
dc.subject | ICAM-1 | |
dc.subject | TGF-β1 | |
dc.subject | IFN-γ | |
dc.subject | IL-10 | |
dc.subject | Sinalização intracelular | |
dc.subject | Toxoplasmose | |
dc.subject | BeWo trophoblast cells | |
dc.subject | HeLa cells | |
dc.subject | Intracellular pathways | |
dc.subject | CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::IMUNOLOGIA::IMUNOLOGIA APLICADA | |
dc.title | Influência das citocinas IL-10, TGF-β1 e IFN-γ na susceptibilidade de células
trofoblásticas humanas (linhagem BeWo) e células epiteliais uterinas humanas
(linhagem HeLa) à infecção por Toxoplasma gondii: papel na expressão de ICAM-1, na
adesão do parasito à célula hospedeira e vias de sinalização intracelulares ativadas | |
dc.type | Tese | |