dc.contributorCoelho, Milton Vieira
dc.contributorhttp://lattes.cnpq.br/9152678955599952
dc.contributorIzidoro, Luiz Fernando Moreira
dc.contributorDuarte, Gilvan Caetano
dc.creatorLacerda, Rogério de Freitas
dc.date2019-07-12T13:35:27Z
dc.date2019-07-12T13:35:27Z
dc.date2004-06-29
dc.date.accessioned2023-09-28T21:03:18Z
dc.date.available2023-09-28T21:03:18Z
dc.identifierLACERDA, Rogério de Freitas. Ligação de miosina V de citosol de cérebro bovino em coluna Q-sepharose. 36 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação em Ciências Biológicas) – Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2004.
dc.identifierhttps://repositorio.ufu.br/handle/123456789/26015
dc.identifier.urihttps://repositorioslatinoamericanos.uchile.cl/handle/2250/9063215
dc.descriptionTrabalho de Conclusão de Curso (Graduação)
dc.descriptionOs resultados deste trabalho mostram a comparação de ensaios com cérebro bovino submetidos à 3 condições, mantendo o pH 8,0 acrescentado ou não pirofosfato 100 mM e alterando o pH para 9,0. Foi homogeneizado cerca de 1 g de cérebro em 10 mL de tampão de extração. O homogeneizado foi centrifugado a 45.000 x g durante 40 minutos a 4 ° C. A fração SI, dos três ensaios foi aplicada em coluna Q-Sepharose. Para amostras com pH 8,0 obtivemos uma retenção de grande número de polipeptídios e conseqüentemente proteína, juntamente com polipeptídio com mobilidade em SDS semelhante à miosina V. Nos eluatos com NaCI 250 mM observamos dentre outros o polipeptídio de interesse com pequena atividade ATPásica que não é recuperada após diálise. Ao passo que polipeptídio em torno de 83, 31, 30 e 23 kDa juntamente com outros de 43 e 47 kDa são evidentes nos eluatos com 500 mM de NaCI, sem atividade Mg2+-ATPásica. O ensaio com pH 9,0 obteve similar perfil em SDS-PAGE, contudo houve pouca retenção de proteínas e os eluatos com 250 mM de NaCI mesmo tendo um polipeptídio com peso molecular igual a miosina V, não foi verificado atividade ATPásica. Se tratando do ensaio com pH 8,0 e pirofosfato houve pouca retenção de polipeptídios. Neste caso apenas os eluatos com 500 mM de NaCI obtiveram resultados expressivos e similares aos dois ensaios anteriores, salve as exceções dos polipeptídios em torno de 66 e 43 kDa. O eluatos do ensaio com pH 8,0 e pirofosfato não obtiveram atividade, como se era esperado. No caso do ensaio com pH 9,0 foi reaplicado o void novamente em coluna Q-sepharose obtendo quase completa retenção de proteínas e atividade nula, com concomitante retenção do polipeptídio com motilidade similar a miosina V.
dc.formatapplication/pdf
dc.languagepor
dc.publisherUniversidade Federal de Uberlândia
dc.publisherBrasil
dc.publisherCiências Biológicas
dc.rightsAcesso Aberto
dc.subjectATPase
dc.subjectMiosina-V
dc.subjectQ-sepharose
dc.subjectCNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::BIOQUIMICA
dc.titleLigação de miosina V de citosol de cérebro bovino em coluna Q-sepharose
dc.typeTrabalho de Conclusão de Curso


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