Vilos placentários humanos modulam a susceptibilidade de células HUVEC (células endoteliais da veia umbilical humana) à infecção por Toxoplasma gondii

Human placental villi modulate the susceptibility of HUVEC cells (human umbilical vein endothelial cells) to infection by Toxoplasma gondii

dc.contributorFranco, Priscila
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dc.contributorFerro, Eloisa Amália Vieira
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dc.contributorGomes, Angelica de Oliveira
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dc.contributorCosta, Idessania Nazareth
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dc.contributorFilice, Leticia de Souza
dc.contributorOliveira, Juliana
dc.creatorMilian, Iliana Claudia Balga
dc.date2021-11-23T16:50:27Z
dc.date2021-11-23T16:50:27Z
dc.date2021-08-20
dc.date.accessioned2023-09-28T20:14:49Z
dc.date.available2023-09-28T20:14:49Z
dc.identifierMILIAN, Iliana Claudia Balga. Vilos placentários humanos modulam a susceptibilidade de células HUVEC (células endoteliais da veia umbilical humana) à infecção por Toxoplasma gondii. 2021. 116 f. Tese (Doutorado em Imunologia e Parasitologia Aplicadas) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2021. DOI http://doi.org/10.14393/ufu.te.2021.366.
dc.identifierhttps://repositorio.ufu.br/handle/123456789/33498
dc.identifierhttp://doi.org/10.14393/ufu.te.2021.366
dc.identifier.urihttps://repositorioslatinoamericanos.uchile.cl/handle/2250/9046022
dc.descriptionToxoplasma gondii has the property of invading tissues and crossing biological barriers in infected humans. The parasite reaches immune-privileged sites such as the placenta and infects different populations of placental cells as well as endothelial cells. In this study, we investigated the influence of culture medium (conditioned medium) from chorionic villi explants, infected or not by T. gondii, on human umbilical vein endothelial cells (HUVEC). HUVEC cells were infected with T. gondii RH (2F1) tachyzoites and treated with conditioned medium infected or not infected with T. gondii. The intracellular proliferation of the parasite was analyzed by colorimetric β-galactosidase assay and cytokine dosage by ELISA. Permeability and electrical resistance (TEER) were also analyzed using fluorescence assay in transwell culture. ZO-1 protein expression was performed by immunofluorescence and ICAM-1 expression by Western blotting. Infected cells treated with conditioned medium had a high parasite load, greater production of pro-inflammatory cytokine and greater permeability in opposition to transepithelial electrical resistance. Treatment with infected or uninfected conditioned medium, as well as infection of HUVEC cells induced lower expression of ZO-1. ICAM-1 expression was altered by the conditioned medium, regardless of infection, in HUVEC cells, infected or not. Inhibition of the adhesion protein ICAM-1 increased parasite proliferation in HUVEC cells. Taken together, the data demonstrated that T. gondii infection and treatment with infected conditioned media alter cytokine secretion and electrical resistance, increasing cell permeability due to an alteration of ICAM-1 and decreased expression of ZO- 1 thus facilitating parasitic proliferation in HUVEC cells.
dc.descriptionCAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior
dc.descriptionTese (Doutorado)
dc.descriptionToxoplasma gondii tem a propriedade de invadir tecidos e atravessar barreiras biológicas em humanos infectados. O parasita alcança locais imune-privilegiados, como a placenta e infecta diferentes populações de células placentárias, bem como as células endoteliais. Neste estudo, investigamos a influência de meio de cultura (meio condicionado) provenientes de explantes de vilosidades coriônicas, infectadas ou não por T. gondii, sobre células endoteliais da veia umbilical humana (HUVEC). As células HUVEC foram infectadas com taquizoítas da cepa RH (2F1) de T. gondii e tratadas com meio condicionado infectado ou não infectados por T. gondii. A proliferação intracelular do parasita foi analisada pelo ensaio colorimétrico de β-galactosidase e a dosagem de citocinas por ELISA. A permeabilidade e a resistência elétrica (TEER) também foram analisadas, utilizando ensaio de fluorescência em cultura em transwell. A expressão da proteína ZO-1 foi realizada pela imunofluorescência e a expressão de ICAM-1 por Western blotting. As células infectadas e tratadas com meio condicionado apresentaram alta carga parasitária, maior produção de citocina pró-inflamatória e maior permeabilidade em oposição à resistência elétrica transepitelial. O tratamento com meio condicionado infectado ou não, bem como a infecção das células HUVEC induziram menor expressão de ZO-1. A expressão de ICAM-1 foi alterada pelo meio condicionado, independente da infecção, em células HUVEC, infectadas ou não. A inibição da proteína de adesão ICAM-1, aumentou a proliferação parasitária nas células HUVEC. Tomados em conjunto, os dados demonstraram que a infecção por T. gondii e o tratamento com meio condicionado infectado alteram a secreção de citocinas e a resistência elétrica, aumentando a permeabilidade celular devido a uma alteração de ICAM-1 e diminuição da expressão de ZO-1 assim facilitando a proliferação parasitária nas células HUVEC.
dc.formatapplication/pdf
dc.languagepor
dc.publisherUniversidade Federal de Uberlândia
dc.publisherBrasil
dc.publisherPrograma de Pós-graduação em Imunologia e Parasitologia Aplicadas
dc.rightsAcesso Aberto
dc.subjectToxoplasma gondii
dc.subjectExpressão de ICAM-1
dc.subjectCélulas HUVEC
dc.subjectCitocinas
dc.subjectPermeabilidade celular
dc.subjectResistência elétrica
dc.subjectZO-1
dc.subjectHUVEC cells
dc.subjectICAM-1 expression
dc.subjectCytokines
dc.subjectcell permeability
dc.subjectelectrical resistance
dc.subjectCNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS
dc.subjectCNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::MORFOLOGIA
dc.subjectCNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::IMUNOLOGIA
dc.subjectCNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::PARASITOLOGIA
dc.subjectImunologia
dc.subjectToxoplasma gondii
dc.subjectDoenças parasitárias
dc.subjectCordão umbilical - Infecção
dc.titleVilos placentários humanos modulam a susceptibilidade de células HUVEC (células endoteliais da veia umbilical humana) à infecção por Toxoplasma gondii
dc.titleHuman placental villi modulate the susceptibility of HUVEC cells (human umbilical vein endothelial cells) to infection by Toxoplasma gondii
dc.typeTese


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