O mirtilo é uma espécie com potencial de crescimento de produção devido às vantagens nutritivas do fruto e a maior demanda durante a entressafra na Europa e nos Estados Unidos. A propagação comercial dessa espécie é realizada pelo método da estaquia, contudo, a taxa de estacas enraizadas é baixa, o que dificulta a multiplicação. Assim, objetivou-se avaliar a influência de diferentes substratos e produtos promotores de enraizamento na produção de mudas de mirtilo da variedade Jewel pelo método da estaquia. O experimento foi implantado no Setor de Fruticultura do Departamento de Agricultura da Universidade Federal de Lavras, no município de Lavras-MG, em março de 2020. Para a obtenção dos dados, foram realizados dois experimentos, em ambiente de estufa de nebulização e em ambiente de telado com câmara úmida. Para a realização do experimento, em ambiente de estufa de nebulização, foi empregado o fatorial duplo de 7x4, com quatro repetições e cada parcela útil contendo dez estacas. Nesse ambiente, os tratamentos utilizados foram sete substrato (areia, casca de arroz carbonizada, fibra de coco, fibra de coco casaca de arroz, perlita, substrato comercial e vermiculita) e quatro produtos que promovem o enraizamento (ácido indolbutírico (AIB) líquido, AIB em pó, Radifarm e testemunha (água)). O experimento em ambiente de telado com câmara úmida foi desenvolvido em fatorial duplo 3x4, contendo apenas três substratos (areia, vermiculita e substrato comercial) e os mesmos enraizadores do experimento localizado em estufa de nebulização. As doses utilizadas para esses produtos, em ambos os experimentos, foram de 3000 ppm para AIB líquido e em pó e 3 ppm para o Radifarm. Após três meses do início do experimento, as estacas foram retiradas dos substratos, avaliadas e foi calculada a porcentagem de estacas enraizadas. Os dados foram submetidos a análise de variância, pelo método de Tukey à 5. Para as estacas enraizadas, em ambiente de nebulização, não houve interação entre substrato e enraizador, enquanto, para as estacas em ambiente de telado com câmara úmida, houve interação entre os fatores. Com relação ao ambiente de nebulização, os melhores substratos foram casca de arroz (78,90), substrato comercial (77,34) e casca de arroz fibra de coco (64,84). Para os substratos em ambiente de telado com câmara úmida, com exceção do substrato comercial que apresentou como melhor enraizador o AIB em pó (66,75), os demais substratos apresentaram maior porcentagem média de estacas enraizadas utilizando o Radifarm, sendo 50,25 para a vermiculita e 34,25 para a areia. Os resultados indicam a importância da escolha adequada do substrato e do produto promotor do enraizamento para a propagação do mirtileiro.