Trabalho de conclusão de graduação
Avaliação do efeito anti-helmíntico do extrato bruto da planta Tocoyena bullata no modelo Caenorhabditis elegans
Registro en:
SOUZA, Mateus Rangel. Avaliação do efeito anti-helmíntico do extrato bruto da planta Tocoyena bullata no modelo Caenorhabditis elegans. 2022. 67 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Bacharelado em Farmácia) – Instituto de Ciências Farmacêuticas, Universidade Federal do Rio de Janeiro, Macaé, 2022.
Autor
Souza, Mateus Rangel
Institución
Resumen
Programa Institucional de Iniciação Científica (Pibic) UFRJ Os helmintos são metazoários, sendo muitas espécies parasitas que podem infectar o homem, impactando negativamente sua saúde. O modelo experimental utilizado para testes de atividade anti-helmíntica é o Caenorhabditis elegans, um nematoide de vida livre, que apresenta alta disponibilidade, facilidade de cultura e rápido ciclo de vida, sendo utilizado no desenvolvimento de novos fármacos e que compartilha diversas características com nematoides parasitas de humanos. Os produtos naturais vêm sendo avaliados pelas suas propriedades anti-helmínticas, e grande fonte desses produtos são plantas coletadas no Parque Nacional da Restinga de Jurubatiba. O objetivo do trabalho foi avaliar a atividade anti-helmíntica do extrato bruto de Tocoyena bullata em ovos, larvas e adultos de C. elegans. A cepa N2 de C. elegans foi mantida em laboratório utilizando Escherichia coli cepa OP50 como fonte alimentar a 20ºC. O extrato foi cedido pela Profª Drª Michelle Frazão Muzitano (LPBio/UFRJ). Foi realizada a sincronização da cultura para obtenção de ovos do C. elegans a partir da lise dos helmintos adultos com solução de NaOH 5% e NaOCl 6%. Após 30 horas, são obtidas as larvas L3-L4 e 72 horas depois, os adultos. Cerca de 30 espécimes de ovos, L3-L4 e adultos foram incubados com o extrato de T. bullata nas concentrações de 5, 10, 25, 50, 100 e 200 µg/mL. A condição DMSO 0,01% foi utilizada como controle. O efeito nos ovos foi avaliado pela eclosão de larvas L1, e nas larvas L3-L4 e nos adultos, avaliou-se a sobrevivência dos mesmos. As alterações morfológicas foram analisadas através da microscopia óptica utilizando-se o microscópio óptico Olympus BX51 acoplado a câmera DP-71. Para o cálculo do IC 50, o percentual de sobrevivência de larvas e adultos e de eclosão de L1 foram plotados em função da concentração do composto utilizando-se uma análise não-linear com o programa GraphPad Prism 5 (GraphPad Software, Inc., EUA). Houve diminuição estatisticamente significativa na eclosão de larvas L1 e na sobrevivência de larvas L3-L4, obtendo-se IC 50 de 344,7 µg/mL e 194,6 µg/mL, respectivamente, assim como em outros estudos na pesquisa de produtos naturais promissores. Em adultos, o efeito foi mais acentuado, diminuindo drasticamente sua sobrevivência, sendo obtido IC 50 de 32,12 µg/mL. Por microscopia óptica, foi possível observar alterações cuticulares e degenerações das estruturas internas, tanto de larvas quanto dos adultos, em quase todas as concentrações avaliadas. Além disso, é possível perceber o fenômeno endotokia matricida em adultos tratados com o extrato a 25 e 50 µg/mL. Tais alterações encontradas afetam sua integridade, metabolismo e comprometem a sobrevivência do nematoide. Nossos resultados demonstram o potencial efeito anti-helmíntico de T. bullata, com diminuição significativa na sobrevivência e danos morfológicos relevantes. Dessa forma, o extrato bruto apresenta potencial efeito anti-helmíntico utilizando-se o modelo C. elegans.