Dissertation
Avaliação do papel de neutrófilos humanos no controle da infecção de Leishmania Amazonensis em células dendríticas
Registro en:
SANTOS, Rafael Teixeira Tibúrcio dos. Avaliação do papel de neutrófilos humanos no controle da infecção de Leishmania Amazonensis em células dendríticas. 2019. 77 f. Dissertação (Mestrado em Patologia Humana) – Universidade Federal da Bahia; Instituto Gonçalo Moniz, Fundação Oswaldo Cruz, Salvador, 2019.
Autor
Santos, Rafael Teixeira Tibúrcio dos
Resumen
INTRODUÇÃO: As leishmanioses constituem uma coletânea de doenças de caráter negligenciado que afligem milhões de pessoas em escala global. Tal patologia é causada por protozoários pertencentes ao gênero Leishmania cujos vetores de transmissão são artrópodes flebotomínios que albergam o parasito. A infecção se inicia durante o repasto sanguíneo do flebotomínios, quando ocorre a inoculação das formas promastigotas do parasita e componentes salivares imunomodulatórios na pele do hospedeiro mamífero. Diversos tipos de células imunes participam sinergicamente da resposta contra a Leishmania. Dentre estas células, destacam-se os neutrófilos, células polimorfonucleares que desempenham papel fundamental no recrutamento e ativação de outras células imunológicas. Neutrófilos são capazes de estabelecer um diálogo íntimo com células dendríticas através de receptores de membrana como o DC-SIGN, promovendo então o estabelecimento de respostas imunológicas integradas no controle da infecção. Contudo, pouco se sabe a respeito do papel de neutrófilos ativados no desfecho da infecção de Leishmania amazonensis em células dendríticas humanas. OBJETIVO: O presente estudo teve como objetivo investigar os mecanismos empregados por neutrófilos humanos no controle da infecção por L. amazonensis em células dendríticas. MATERIAL E MÉTODOS: neutrófilos e células dendríticas humanas foram purificadas a partir de sangue periférico de doadores saudáveis. Os neutrófilos foram ativados com fibronectina por 1 hora e subsequentemente incubados com células dendríticas infectadas por L. amazonensis. RESULTADOS: Nossos resultados apontam a participação dos neutrófilos no controle da infecção de maneira independente do seu estado de ativação. A neutralização de enzimas presentes nos grânulos dos neutrófilos apontou que a eliminação do parasita ocorre de maneira independente de tais enzimas. Verificamos que a destruição de Leishmania foi dependente do contato direto via DCSIGN entre neutrófilos e células dendríticas. Observamos que a produção de mediadores lipídicos e maturação de células dendríticas também ocorreu de maneira dependente deste receptor. Por fim, observamos que a destruição parasitária necessitou da participação do TNFα e LTB4 produzidos na co-cultura. CONCLUSÃO: Coletivamente, nossos resultados demonstraram que neutrófilos humanos modulam tanto a maturação como a capacidade de células dendríticas infectadas em destruir o parasito de maneira dependente do contato físico direto por intermédio do DC-SIGN e da subsequente produção de TNFα e mediadores lipídicos. O presente trabalho foi realizado com apoio da Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Brasil (CAPES) – Código de Financiamento 001. INTRODUCTION: Leishmaniasis is a collection of neglected diseases that afflict millions of people on a global scale. This pathology is caused by protozoa belonging to the genus Leishmania whose transmission vectors are phlebotominal arthropods that harbor the parasite. The infection begins during the blood meal of sand flies, when the promastigote forms of the parasite and immunomodulatory salivary components in the skin of the mammalian host occurs. Several types of immune cells participate synergistically in the response against Leishmania. Among these cells, neutrophils, polymorphonuclear cells that play a key role in the recruitment and activation of other immune cells, stand out. Neutrophils are able to establish an intimate dialogue with dendritic cells through membrane receptors such as DC-SIGN, thus promoting the establishment of integrated immune responses in the control of infection. However, little is known about the role of activated neutrophils in the outcome of Leishmania amazonensis infection in human dendritic cells. OBJECTIVE: The present study sought to investigate the relevance of the interaction between activated neutrophils and infected dendritic cells in the course of in vitro infection by L. amazonensis. MATERIAL AND METHODS: Neutrophils and human dendritic cells were purified from peripheral blood from healthy donors. Neutrophils were activated with fibronectin for 1 hour and subsequently incubated with dendritic cells infected by L. amazonensis. RESULTS: Our results indicate the participation of neutrophils in infection control independently of their activation state. Neutralization of enzymes present in the neutrophil granules pointed out that elimination of the parasite occurs independently of such enzymes. We found that the destruction of Leishmania was dependent on direct contact via DC-SIGN between neutrophils and dendritic cells. We note that the production of lipid mediators and maturation of dendritic cells also occurred in a manner dependent on this receptor. Finally, we observed that parasite destruction needed the participation of TNFα and LTB4 produced in the co-culture. CONCLUSION: Our results have shown that human neutrophils modulate both the maturation and the ability of infected dendritic cells to destroy the parasite in a manner dependent on direct physical contact through DC-SIGN and the subsequent production of TNFα and lipid mediators.