Thesis
Desenvolvimento de um produto moluscicida do látex extraído de Euphorbia milii var. hislopii para aplicação no controle da esquistossomose mansoni
Registro en:
ANDRADE, Cynthia de Paula. Desenvolvimento de um produto moluscicida do látex extraído de Euphorbia milii var. hislopii para aplicação no controle da esquistossomose manson. 2019. 92 f. Tese (Doutorado em Saúde Coletiva)-Instituto René Rachou, Fundação Oswaldo Cruz, Belo Horizonte, 2019.
Autor
Andrade, Cynthia de Paula
Resumen
O uso de moluscicida é uma das medidas de controle da transmissão do parasito Schistosoma mansoni, causador da esquistossomose mansoni, que atua na eliminação de seus hospedeiros intermediários, caramujos do gênero Biomphalaria. No Brasil, as espécies Biomphalaria glabrata, Biomphalaria tenagophila e Biomphalaria straminea são encontradas naturalmente
infectadas, mantendo a transmissão do parasito. O látex de Euphorbia milii tem mostrado bons resultados como moluscicida natural contra espécies de Biomphalaria. Dessa forma, o objetivo principal deste trabalho foi desenvolver um kit protótipo de moluscicida a base do látex de E. milii. Para isso, o cultivo de E. milii foi aprimorado visando a produção em maior escala. Após a coleta, o látex foi processado, aliquotado e liofilizado. O produto liofilizado foi
reidratado com duas soluções aquosas (“Diluente” 1 e “Diluente” 2) definidas neste estudo. Após a prova de conceito, um kit protótipo foi produzido e denominado de MoluSchall, em homenagem à Drª Virgínia Torres Schall. O produto foi testado, em triplicata, nas diluições de 1; 2; 4; 8 e 12 μL/L de água contra B. glabrata, B. tenagophila e B. straminea, com o objetivo
de determinar a diluição letal para 100% (DL100) dos caramujos de cada espécie. Testes com B. glabrata infectadas com S. mansoni também foram realizados nas mesmas diluições. A estabilidade do produto foi avaliada, a cada dois meses, pela atividade moluscicida de protótipos armazenados em temperaturas de 2–8°C (geladeira), 22–26°C (ambiente) e 37°C (estufa). Alevinos de Danio rerio (Zebrafish) foram submetidos às diluições de 8; 16; 32; 64 e 128 μL/L de meio E2 para avaliação da toxicidade do produto. O produto também foi avaliado em condições semi-naturais contra B. glabrata em tanques, tratados com o moluscicida nas diluições de 8 e 12 μL/L. As DLs100 encontradas para os caramujos foram de 4μL/L para B. tenagophila e 8 μL/L para B. glabrata e B. straminea. Já no teste toxicológico, as diluições 8 e 16 μL/L não foram letais para D. rerio. Com relação ao teste de estabilidade, o produto manteve-se estável durante 24 meses, independente da temperatura de armazenamento. Nos tanques, foi observado 100% de mortalidade de B. glabrata expostas às diluições de 8 e 12 μL/L, resultado similar ao encontrado nos testes de laboratório. O MoluSchall foi eficaz na mortalidade das três espécies de Biomphalaria, com baixa toxicidade
para D. rerio e estabilidade por um período de 24 meses. A DL100 definida em laboratório para B. glabrata se manteve quando o produto foi usado em condições semi-naturais. Assim, cada kit protótipo permite tratar 12.500 litros de água. MoluSchall é um moluscicida natural promissor e poderá contribuir para o controle da transmissão de Schistosoma mansoni. FAPEMIG The use of molluscicides is one of the control measures for Schistosoma mansoni transmission, which causes schistosomiasis mansoni. This molluscicide acts in the elimination of intermediate hosts, snails of the genus Biomphalaria. In Brazil, the species Biomphalaria glabrata, Biomphalaria tenagophila and Biomphalaria straminea are found naturally infected, maintaining the transmission cycle of the parasite. Latex of Euphorbia milii has shown good results as a natural molluscicide against Biomphalaria species. Thus, the main goal of this work was to develop a prototype molluscicide kit based on E. milii latex. For this, E. milii cultivation has been improved for larger scale production. After collection, the latex was processed, aliquoted and lyophilized (-55ºC, 0.022 mbar, 24 hours). The lyophilized product was rehydrated with two aqueous solutions ("Diluent" 1 and "Diluent" 2) defined in this study. After proof of concept, a prototype kit was produced and named MoluSchall, in honor of Dr. Virginia Torres Schall. The product was tested, in triplicate, at the dilutions of 1; 2; 4; 8 and 12 μL/L of water against B. glabrata, B. tenagophila and B. straminea, with the objective of determining the lethal dilution to 100% (LD100) of the snails of each species. Tests with B. glabrata infected with S. mansoni were also performed at the same dilutions. The stability of the product was evaluated every two months by the molluscicidal activity prototypes stored at temperatures of 2-8° C (refrigerator), 22-26° C (ambient) and 37° C (stove). Danio rerio (Zebrafish) fingerlings were submitted to dilutions of 8; 16; 32; 64 and 128 μL/L in E2 medium to evaluate the toxicity of the product. The product was also evaluated in semi-natural conditions against B. glabrata in tanks, treated with molluscicide at 8 and 12 μl/L dilutions. The LDs100 found for snails were 4 μL/L for B. tenagophila and 8μL/L for B. glabrata and B. straminea. In the toxicological test, dilutions of 8 and 16 μL/L were not lethal for D. rerio. Regarding the stability test, the product remained stable for 24 months, regardless of storage temperature. In the tanks, 100% of B. glabrata mortality was observed exposed to dilutions of 8 and 12 μL/L, a result similar to that found in laboratory tests. Thus, MoluSchall proved effective in eliminating the three species of Biomphalaria, presented low toxicity to D. rerio and stability for a period of 24 months. The DL100 defined in the laboratory for B. glabrata was retained when the product was used under semi-natural conditions. Thus, each prototype kit allows to treat 12,500 liters of water. MoluSchall is a promising natural molluscicide and may contribute to the control of Schistosoma mansoni transmission.