| dc.contributor | Coelho, Paulo Marcos Zech | |
| dc.contributor | Silva, Luciana Maria | |
| dc.contributor | Coelho, Paulo Marcos Zech | |
| dc.contributor | Carvaho, Andreia Teixeira de | |
| dc.contributor | Côrrea, Deborah Aparecida Negrão | |
| dc.contributor | Rosa, Florence Mara | |
| dc.contributor | Caldeira, Roberta Lima | |
| dc.creator | Silva Neto, Aristeu | |
| dc.date | 2017-06-28T19:42:27Z | |
| dc.date | 2017-06-28T19:42:27Z | |
| dc.date | 2016 | |
| dc.date.accessioned | 2023-09-26T23:39:31Z | |
| dc.date.available | 2023-09-26T23:39:31Z | |
| dc.identifier | SILVA NETO, Aristeu. Cultura de células de tecidos de Biomphalaria tenagophila (Orbigny, 1835) e Biomphalaria glabrata (Say, 1918) como ferramenta no estudo das interações entre hospedeiro invertebrado e Schistosoma mansoni (Sambom, 1907. 2016. 78 f. Tese (Doutorado em Ciências - Concentração Doenças Infecciosas e Parasitárias)-Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, Instituto René Rachou, Fundação Oswaldo Cruz, Belo Horizonte, | |
| dc.identifier | https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/19660 | |
| dc.identifier.uri | https://repositorioslatinoamericanos.uchile.cl/handle/2250/8892867 | |
| dc.description | A esquistossomose mansoni é uma doença endêmica no
Brasil, causada pelo trematódeo
digeneico
Schistosoma mansoni
. Em seu ciclo de vida, o parasito tem uma passagem
obrigatória por caramujos do gênero
Biomphalaria
, hospedeiros invertebrados que ocupam
papel central no processo de transmissão da doença.
O estudo da interação entre parasito-
hospedeiro invertebrado vem se desenvolvendo ao lon
go dos anos, entretanto sem solucionar
a carência de modelos
in vitro
que simulem a infecção. As células
Bg
e, modelo estabelecido
para se estudar a interação, não estão mais disponí
veis nos bancos de células comerciais,
restando apenas modelos celulares de curta duração.
Com o objetivo de explorar novas
ferramentas no estudo das interações parasito-hospe
deiro invertebrado em esquistossomose,
realizamos o presente estudo que estabeleceu, carac
terizou e explorou a funcionalidade de
culturas celulares primárias de espécimes adultos d
e
Biomphalaria
como modelos na
interação
in vitro
com esporocistos de
S. mansoni
. Foram utilizadas duas espécies de
caramujos,
Biomphalaria glabrata
, como modelo susceptível à infecção por
S. mansoni,
e
Biomphalaria tenagophila
Taim, como modelo de resistência absoluta à infecção
por este
mesmo parasito. Baseados em características ultraes
truturais das células em culturas primárias
derivadas de diversos tecidos, selecionamos as célu
las derivadas da glândula digestiva e do
tubo renal sacular para os ensaios de interação com
o parasito. As culturas celulares derivadas
da glândula digestiva de
B. tenagophila
Taim foram capazes de matar,
in vitro
, esporocistos
primários de
S. mansoni
. As culturas primárias derivadas do tubo renal sac
ular dessa mesma
linhagem, e as culturas homólogas de
B. glabrata
, dos dois tecidos, não apresentaram esta
atividade letal em ensaios
in vitro
. Para acompanhamento de possíveis alterações molec
ulares
nas culturas celulares após interação com o parasit
o, utilizamos a expressão do transcrito
aif
,
estimulador da atividade e proliferação de hemócito
s, como indicador. Após a interação, a
expressão de
aif
foi aumentada, somente nas células derivadas da gl
ândula digestiva de
B.
tenagophila
Taim, corroborando os resultados anteriores. A análi
se ultraestrutural das células
das culturas testadas mostrou que, dentre as célula
s derivadas da glândula digestiva, há um
perfil de hemócitos tipo-granulócitos diferentes do
s hemócitos tipo-granulócitos circulantes.
O perfil ultraestrutural de células derivadas do tu
bo renal sacular apresentaram semelhança
com o obtido, anteriormente, para células do órgão
produtor de hemócitos (APO). No entanto,
os testes de atividade sugerem que, apesar das seme
lhanças, tratam-se de culturas distintas.
Para a obtenção de modelos não senescentes, foi rea
lizada a tentativa de imortalização das
culturas de células derivadas do tubo renal sacular
de
B. tenagophila
Taim, através da
introdução do gene da telomerase transcriptase reve
rsa. Entretanto as tentativas de
imortalização dos modelos analisados foram ineficaz
es, com dificuldades na obtenção de
culturas livres de contaminantes biológicos e ausên
cia de proliferação celular. O presente
trabalho mostra, pela primeira vez, a ação letal de
hemócitos presentes na glândula digestiva
de caramujos
B. tenagophila
linhagem Taim contra esporocistos de
S. mansoni
. A prioridade
para continuação da linha de pesquisas aponta para
novas tentativas de imortalização visando
a obtenção de uma nova ferramenta para o estudo da
interação
Biomphalaria/S. mansoni
. | |
| dc.description | Schistosomiasis is an endemic disease in Brazil cau
sed by
Schistosoma mansoni
, a digenetic
trematode. In its life cycle, the parasite has an o
bligatory passage through invertebrate
Biomphalaria
hosts, which play a central role in the transmissi
on of the disease. Although a
number of studies have been developed on the invert
ebrate host-parasite interaction,
in vitro
–
cells (standing for
Biomphalaria glabrata
embryonic cells), in the past. However, those cell
s
are no longer commercially available and short-time
cell models have emerged as alternatives.
Aiming at exploring such models in schistosomiasis,
in the present study we have established
and characterized primary cell cultures from differ
ent organs and tissues of
Biomphalaria.
Based on ultrastructural features of the cells in c
ulture, we focused the study on digestive
gland and saccular kidney cells Although the cells
from saccular kidney cultures resembled
the cells from the hemocyte producing organ (APO),
previously described, activity tests have
suggested that these cultures are not the same. Nex
t, we have investigated the ability of the
selected cultured cells to interact with
S. mansoni
sporocysts using
in vitro
assays.
B. glabrata
and
B. tenagophila
Taim have been used as models of susceptibility and
absolute resistance
against the parasite infection, respectively. Cells
from the digestive gland of
B. tenagophila
Taim have been able to fully eliminate primary sporo
cysts of
S. mansoni
in vitro
. Homolog
cultures from
B. glabrata
have been apparently ineffective, as well as cells
derived from the
saccular kidney of both species. The present study h
as shown, for the first time, that
hemocytes from digestive gland of
Biomphalaria
t
enagophila
Taim may play a role in the
resistance to
S. mansoni
infection. Detailed ultrastructural analyses of th
ese cells have shown
a granulocyte-like profile. Possible molecular chan
ges have been monitored by the expression
of
aif–
a gene known to stimulate hemocyte activity and pro
liferation
–
after the hemocyte-
sporocyst interaction.
Aif
expression has increased only in digestive gland c
ells of
B.
tenagophila
Taim, which supports our previous results. Immortal
ization attempts have been
carried out by introducing the telomerase reverse t
ranscriptase gene with no success. The
present study has open new possibilities of use of
an
in vitro
model to investigate invertebrate
host-parasite interactions in schistosomiasis. | |
| dc.format | application/pdf | |
| dc.language | por | |
| dc.rights | open access | |
| dc.subject | Esquistossomose | |
| dc.subject | Schistosoma mansoni | |
| dc.subject | Biomphalaria | |
| dc.subject | Interações parasito- hospedeiro | |
| dc.subject | cultura de células de invertebrados | |
| dc.subject | Schistosomiasis | |
| dc.subject | Schistosoma mansoni | |
| dc.subject | Biomphalaria | |
| dc.subject | Host-parasite interactions | |
| dc.subject | invertebrate cell cultures. | |
| dc.subject | Esquistossomose mansoni | |
| dc.subject | Schistosoma mansoni | |
| dc.subject | Interações Hospedeiro-Parasita | |
| dc.title | Cultura de células de tecidos de Biomphalaria tenagophila (Orbigny, 1835) e Biomphalaria glabrata (Say, 1918) como ferramenta no estudo das interações entre hospedeiro invertebrado e Schistosoma mansoni (Sambom, 1907) | |
| dc.type | Thesis | |
