Dissertation
Detecção de Leishmania spp. em Lutzomyia spp. em um fragmento de mata Atlântica no estado de Pernambuco, Brasil
Detection of Leishmania spp. in Lutzomyia spp. in a fragment of Atlantic forest in the State of Pernambuco, Brazil
Registro en:
SILVA, Yury Yzabella da. Detecção de Leishmania spp. em Lutzomyia spp. em um fragmento de mata Atlântica no estado de Pernambuco, Brasil. 2018. 67 pilus. Dissertação, (mestrado)-Instituto Aggeu Magalhães, Fundação Oswaldo Cruz, Recife, 2018.
Autor
Silva, Yury Yzabella da
Resumen
A leishmaniose tegumentar americana (LTA) é uma zoonose de grande relevância, sendo uma das mais importantes doenças tropicais negligenciadas nas Américas. A LTA é causada por protozoários do gênero Leishmania, que são transmitidos por flebotomíneos (Diptera: Psychodidae: Phlebotominae). No Brasil, a doença ocorre em todas as regiões geográficas, porém sua incidência é maior nas regiões norte e nordeste do país. Em Pernambuco, surtos de LTA foram registrados no Campo de Instrução Militar Marechal Newton Cavalcanti (CIMNC), um campo de treinamento militar localizado em remanescente de mata atlântica. Estudos sugerem que uma grande diversidade de espécies de flebotomíneos que poderiam atuar como vetores de Leishmania braziliensis, principal agente etiológico da LTA no Brasil. Diante disso, o presente trabalho teve como objetivo detectar a presença de Leishmania spp. em fêmeas de Lutzomyia spp. coletadas no CIMNC entre os anos de 2012 a 2014. Para esse fim, foram testadas fêmeas de flebotomíneos (individualmente ou em pools de até 10 fêmeas) pertencentes a cinco diferentes espécies coletadas em diferentes datas e pontos de coleta. Posteriormente, foram realizadas a extração de DNA e a PCR em tempo real para detecção de DNA de Leishmania spp. Os produtos positivos da PCR em tempo real foram digeridos com a enzima de restrição HaeIII e os padrões de bandas analisados por eletroforese. No total, 42 pools (2-10 fêmeas) e 23 fêmeas individuais foram positivas para a presença de DNA de Leishmania spp. Na análise por enzima de restrição, 13 amostras (pertencentes as espécies Lu. longispina, Lu. complexa/wellcomei e Lu. sordellii) apresentaram um padrão de bandas sugestivo de L. braziliensis. Os resultados do presente estudo reforçam a hipótese de que Lu. choti possa estar atuando como vetor de L. braziliensis, além de relatar, pela primeira vez, a presença de DNA de Leishmania spp. em fêmeas de Lu. longispina e Lu. sordellii. Esses resultados indicam que diferentes espécies de flebotomíneos podem estar atuando como vetores de L. braziliensis em remanescentes de mata atlântica em Pernambuco . American tegumentary leishmaniasis (ATL) is a zoonosis of great relevance, being one of the most important neglected tropical diseases in the Americas. The ATL is caused by protozoa of the genus Leishmania, which are transmitted by sand flies (Diptera: Psychodidae: Phlebotominae). In Brazil, the disease occurs in all geographic regions, but its incidence is higher in the north and northeast of the country. In Pernambuco, ATL outbreaks were recorded at the Marechal Newton Cavalcanti Military Training Camp (CIMNC), a military training camp located in Atlantic forest remnants. Studies suggest that a great diversity of sandfly species could act as vectors of Leishmania braziliensis, the main etiological agent of ATL in Brazil. Therefore, the present work aimed to detect the presence of Leishmania spp. in females of Lutzomyia spp. collected at the CIMNC between the years of 2012 to 2014. For this purpose, females of sand flies (individually or in pools of up to 10 females) belonging to five different species collected at different dates and points of collection were tested. Subsequently, DNA extraction and real-time PCR were performed to detect Leishmania spp. The real-time PCR positive products were digested with the restriction enzyme HaeIII and the band standards analyzed by electrophoresis. In total, 42 pools (2-10 females) and 23 individual females were positive for the presence of Leishmania DNA. In restriction enzyme analysis, 13 samples (belonging to the species Lu. longispina, Lu. complexa/wellcomei and Lu. sordellii) presented a band pattern suggestive of L. braziliensis. The results of the present study reinforce the hypothesis that Lu. choti may be acting as a vector of L. braziliensis, besides reporting for the first time the presence of Leishmania DNA in Lu. longispina and Lu. sordellii females. These results indicate that different species of sand flies may be acting as vectors of L. braziliensis in remnants of Atlantic forest in Pernambuco .
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