Thesis
Aplicação da citometria de fluxo no diagnóstico da Leishmaniose Visceral humana e na coinfecção em pessoas vivendo HIV
Registro en:
SILVA, Elis Dionisio da.. Aplicação da citometria de fluxo no diagnóstico da Leishmaniose Visceral humana e na coinfecção em pessoas vivendo HIV. 2019. 122 p. Tese, (doutorado)-Instituto Aggeu Magalhães, Fundação Oswaldo Cruz, Recife, 2019.
Autor
Silva, Elis Dionisio da.
Resumen
A Leishmaniose Visceral (LV) é uma doença grave causada por protozoários do gênero Leishmania que tem como agentes etiológicos as espécies L. infantum e L.donovani. Entre os principais desafios apresentados para o controle da LV está a correta identificação dos casos, principalmente no quadro de coinfecção LV-HIV/AIDS. A presente pesquisa avaliou o uso da citometria de fluxo como uma metodologia alternativa na avaliação diagnóstica de portadores de LV e coinfectados LV-HIV/AIDS. Como resultados foram produzidos três artigos, no primeiro artigo foi realizado um estudo de prevalência de LV em pessoas vivendo com HIV, que identificou um percentual de 16,9%. Esse estudo também demonstrou uma baixa concordância entre os testes convencionais utilizados para o diagnóstico de LV. No segundo artigo, avaliamos a aplicação da citometria de fluxo na identificação de LV em pessoas vivendo com HIV/AIDS, A análise da curva ROC (Receiver Operating Characteristic) indicou uma porcentagem de parasitas fluorescentes positivos (PPFP) de 1,26% como ponto de corte ideal para segregar os resultados positivos e negativos. E com uma diluição 1:2048, a citometria de fluxo apresentou bom desempenho com uma sensibilidade de 89% e especificidade de 83%. Os índices de concordância kappa demonstraram um desempenho substancial entre os testes DAT (κ=0,6) e ELISA (κ=0,6). O terceiro artigo avaliou o desempenho da citometria de fluxo na identificação dos casos de LV. A análise da curva ROC indicou um PPFP de 2% e a diluição 1:4096 foi identificada como ponto de corte ideal. A citometria de fluxo teve o melhor desempenho para o grupo de LV diagnosticado pelo teste parasitológico (sensibilidade de 96%), enquanto o rK39 (teste rápido imunocromatografico) e o DAT (Teste de aglutinação direta) também apresentaram alto desempenho. Esses achados mostram que a citometria de fluxo pode ser uma alternativa sorológica segura para o diagnóstico de LV e da coinfecção LV-HIV/AIDS. Visceral Leishmaniasis (VL) is a serious disease caused by protozoa of the genus Leishmania that has the etiological agents L. infantum and L.donovani. Among the main challenges presented for VL control is the correct identification of cases, especially in the context of VVHIV / AIDS co-infection. The present study evaluated the use of flow cytometry as an alternative methodology in the diagnostic evaluation of VL and VL-HIV / AIDS coinfected patients. As results were produced three articles, in the first article a study of the prevalence of VL in people living with HIV was carried out, which identified a percentage of 16.9%. This study also demonstrated a low agreement between the conventional tests used for the diagnosis of VL. In the second article, we evaluated the application of flow cytometry in the identification of VL in people living with HIV / AIDS. The Receiver Operating Characteristic (ROC) curve indicated a percentage of positive fluorescent parasites (PPFP) of 1.26% as a point ideal for segregating positive and negative results. And at a 1: 2048 dilution, flow cytometry showed good performance with a sensitivity of 89% and specificity of 83%. The kappa concordance indices demonstrated a substantial performance between DAT (κ = 0.6) and ELISA (κ = 0.6). The third article evaluated the performance of flow cytometry in the identification of VL cases. Analysis of the ROC curve indicated a 2% PPFP and the 1: 4096 dilution was identified as the ideal cut point. Flow cytometry had the best performance for the VL group diagnosed by the parasitological test (sensitivity of 96%), while rK39 (immunochromatographic rapid test) and DAT (Direct agglutination test) also showed high performance. These findings show that flow cytometry may be a safe serologic alternative for the diagnosis of VL and VL-HIV / AIDS coinfection. 2023-02-28
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