Dissertation
Infecção natural de Triatoma brasiliensis brasiliensis, Caicó, Rio Grande do Norte, pelo Trypanosoma cruzi e o estudo de peptídeos antimicrobianos em diferentes espécies de triatomíneos (Hemiptera, Heteroptera, Reduviidae)
Autor
Lima, Ana Carolina Bastos de
Resumen
Triatoma brasiliensis é um dos vetores da doença de Chagas no Nordeste do Brasil, apresentando altos índices de infecção natural pelo Trypanosoma cruzi. No presente estudo, dois aspectos foram abordados: primeiro a coleta de exemplares de T. b. brasiliensis oriundos de Caicó, RN, para análise de infecção natural por T. cruzi, em períodos diferentes (abril e novembro de 2011). O segundo aspecto abordado está relacionado ao estudo do gene que codifica defensinas como marcador molecular filogenético para a análise de diferentes espécies de triatomíneos, incluindo o complexo T. brasiliensis, além de exemplares de T. b. brasiliensis coletados em Caicó. Em relação à infecção natural de T. b. brasiliensis por T. cruzi observamos um alto índice (86%), mais especificamente na localidade de Penedo. Também foi observado que não houve diferenças significativas entre as expedições realizadas nos períodos de chuva (abril de 2011) e seca (novembro de 2011)
Além disso, cinco isolados de T. cruzi foram caracterizados molecularmente por duas metodologias: mini-exon, 24S\03B1 rDNA e 18S rDNA. Como resultados observamos os dois genótipos (TcI e TcII) circulando em Caicó. Foram obtidas sequências do gene que codifica defensina, onde diferentes isoformas deste gene puderam ser identificadas e caracterizadas nas diferentes espécies de triatomíneos estudadas. A espécie Panstrongylus megistus ficou nos mesmos clados que representantes do gênero Rhodnius. Houve uma clara separação dos clados em relação aos gêneros Triatoma e Rhodnius. Com relação aos membros do complexo T. brasiliensis, não foi possível uma clara distinção entre as espécies pelo fato da molécula de defensina apresentar menos que 500 bp em seu tamanho, além de ser bastante conservada, não sendo portanto um bom marcador para separar grupos muito proximamente relacionados Triatoma brasiliensis
is one of the main Chagas disease vectors in Northeastern
Brazil, presenting a high natural
Trypanosoma cruzi
infection rate. In the present
work, two diffe
re
nt aspects were investigated: First, t
riatomines of the
sub
species
T.
b.
brasiliensis
were collected in Caicó, RN for analysis of natural infection by
T. cruzi
in two
dissimilar periods (April and N
ovember 2011). The second aspect is related to
use of de
fensin encoding genes as a phylogenetic marker for the study of different
triatomine species, mainly the
T. brasiliensis
species complex, including
T. b.
brasiliensis
specimens from Caicó. The results showed a high infection rate (86%) of
T.
b.
brasiliensi
s
from Caicó by
T. cruzi
, especially in insects from Penedo. No
significant differe
nces between the rainy period (A
pril 2011) and dried season
(November 2011) could be observed. In addition, five
T. cruzi
isolates were cultivated
and characterized by three
different molecular methods (mini
-
exon, 24S
α
rDNA and
18S rDNA). The results showed the presence of TcI and TcII
genotypes circulating in
Caicó
. Defensin encoding genes were amplified and sequenced for different
triatomine species, showing three differing forms.
Panstrongylus
megistus
clustered
tog
ether with
representatives of
the genus
Rhodnius
. A separation between the
genus
Triatoma
and
Rhodnius
could also be detected. However, inside of the
T.
brasiliensis
species complex the taxa
could not be well separated. Since this
molecular marker has a si
ze of less than 500 bp and is highly conserved defensin
encoding sequences might not be a good marker to separate closely related species
and subspecies