Dissertation
Papel de produtos finais de glicação avançada nas alterações hepáticas e metabólicas em modelo experimental de síndrome metabólica
Registration in:
SILVARES, Raquel Rangel. Papel de produtos finais de glicação avançada nas alterações hepáticas e metabólicas em modelo experimental de síndrome metabólica. 2019. 71 f. Dissertação (Mestrado em Biologia Celular e Molecular) - Instituto Oswaldo Cruz, Fundação Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, 2019.
Author
Silvares, Raquel Rangel
Abstract
A doença hepática gordurosa não alcoólica (DHGNA) afeta um terço da população adulta e é definida como o acúmulo de gordura no fígado de indivíduos que não consomem excessiva quantidade de álcool. No entanto, os mecanismos moleculares responsáveis pela progressão da doença ainda não foram completamente elucidados. Estudos anteriores do nosso grupo e outros autores demonstraram que o aumento nos níveis de produtos finais de glicação avançada (AGEs) e distúrbios da microcirculação estão presentes na DHGNA, mas nenhuma evidência direta da ligação entre os níveis de AGEs, estresse oxidativo, inflamação e alterações microcirculatórias hepáticas foi demonstrada. No presente trabalho, nós investigamos os efeitos protetores da piridoxamina (PirPM), um inibidor da formação de AGEs, nas complicações metabólicas e microcirculatórias na DHGNA. A DHGNA foi induzida por uma dieta hiperlipídica (HFD) em ratos Wistar durante 28 semanas. O tratamento com Pir (60 mg/Kg/dia, i.p.) foi administrado entre as semanas 20 e 28. Na microcirculação do fígado, o recrutamento de leucócitos e o número de células estreladas hepáticas (HSC´s) ativadas foram examinados por microscopia intravital A perfusão tecidual foi acessada por fluxometria utilizando o laser speckle. O estresse oxidativo e o marcador de inflamação foram avaliados pela dosagem de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARs) e RT-PCR, respectivamente. Os AGEs no fígado foram avaliados por espectroscopia de fluorescência. Foi observado que a alteração no metabolismo da glicose e aumento do peso corporal, hepático e de tecido adiposo e esteatose no grupo DHGNA foi revertido pelo tratamento com Pir. Em relação aos parâmetros microcirculatórios hepáticos, ratos com DHGNA apresentaram aumento do rolamento e adesão de leucócitos, da ativação de HSCs e diminuição da perfusão tecidual. A Pir mostrou um efeito vasoprotetor nas alterações da microcirculação hepática induzidas pela DHGNA. O fígado de grupo DHGNA apresentou níveis elevados de peroxidação lipídica, que foram parcialmente revertidos pelo tratamento com Pir. Em conclusão, a Pir apresenta importante efeito vasoprotetor e antioxidante, além de modular os distúrbios metabólicos, sendo, portanto, um potencial tratamento para complicações microcirculatórias e metabólicas associadas à DHGNA. Non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) affect one-third of the adult population, and is defined as the accumulation of fat in the liver of patients who do not consume excessive alcohol. However, the molecular mechanisms that account for disease progression remains unclear. Previous studies have demonstrated that the increase in liver advanced glycation end-products (AGEs) levels and microcirculatory disturbances are present in NAFLD however no direct evidence of the link between AGE levels, oxidative stress, inflammatory pathways and hepatic microcirculatory alterations have been demonstrated. We investigated the protective effects of pyridoxamine (1) against metabolic and microcirculatory complications in NAFLD. NAFLD was induced by a high-fat diet (HFD) administration over 28 weeks. Pir treatment was administered between weeks 20 and 28. In the liver microcirculation, the recruitment of leukocytes and the number of vitamin A positive hepatic stellate cells (HSCs) were examined by in vivo microscopic observations. Tissue perfusion was accessed by laser speckle contrast imaging (LSCI) Oxidative stress and inflammatory parameters were assessed by thiobarbituric acid reactive substances measurement (TBARs) and RT-PCR. AGEs in the liver were evaluated by fluorescence spectroscopy. The increase in body, liver, and fat weight observed in the NAFLD group was reverted by Pir treatment. High-fat diet administration induced steatosis and impairment in glucose metabolism, which were attenuated by Pir treatment. Regarding the hepatic microcirculatory parameters, rats with HFD-induced NAFLD showed increased rolling and adhesion of leukocytes, increased HSC activation and decreased tissue perfusion. Pir showed a vasoprotective effect in the hepatic microcirculation of HFD-induced NAFLD. Livers of NAFLD group of rats had elevated levels of lipid peroxidation, which were partially reverted by the Pir treatment. Pir modulates oxidative stress, AGEs, and/or other metabolic disturbances, thus providing important vasoprotective effects. Therefore, Pir may be a potential treatment for microcirculatory and metabolic complications associated with NAFLD.