Dissertation
Caracterização do gene que codifica a enzima tirosina aminotransferase (TcTAT) em populações do Trypanosoma cruzi sensíveis e resistentes ao benzonidazol
Characterization of the gene that codifies the enzyme tyrosine aminotransferase (TAT) in sensible and resistant populations of the Trypanosoma cruzi to benzonidazole
Registro en:
REGO, Juciane Vaz. Caracterização do gene que codifica a enzima tirosina aminotransferase (TcTAT) em populações do Trypanosoma cruzi sensíveis e resistentes ao benzonidazol. 2007. 67 f. Dissertação (Mestrado em Ciências da Saúde) - Centro de Pesquisa René Rachou, Fundação Oswaldo Cruz, Belo Horizonte, 2007.
Autor
Rego, Juciane Vaz
Resumen
A Tirosina aminotransferase (TAT) é uma enzima importante no metabolismo deaminoácidos aromáticos. Existem várias diferenças bioquímicas entre a TAT demamíferos e a de Trypanosoma cruzi (TcTAT). Além disso, o gene TcTAT estásuperexpresso em cepas do parasito que são resistentes ao benzonidazol (BZ),droga atualmente usada na quimioterapia da doença de Chagas. Dessa forma a TATé indicada como um alvo potencial para o desenvolvimento de novos agentesquimioterapêuticos. No presente estudo, caracterizamos o gene da TcTAT em 14cepas e clones do T cruzi resistentes e sensíveis ao BZ. Observamos um únicotranscrito de mRNA de 2,0 Kb em todas as amostras do parasito. Os níveis demRNA de TcTAT foram similares em todas as amostras com exceção das cepasresistentes 17LER e BZR, que apresentaram níveis de mRNA duas vezes maiorcomparado com seus pares sensíveis 17WTS e BZS. O gene TcTAT estáorganizado em arranjos multicópias em tandem e está localizado em 8 bandascromossômicas que variam de 785 a 2500Kb. Não observamos amplificação doTcTAT no genoma do parasito. Uma proteína expressa de 42KDa pelo TcTAT estápresente em todas amostras do T. cruzi. Não observamos nenhuma correlação forteentre o gene TcTAT e resistência a drogas no T. cruzi, entretanto os resultados nãoexcluem que TcTAT possa atuar via mecanismo secundário, juntamente com genesde outras enzimas Various biochemical differences exist between mammalian tyrosine
aminotransferase (TAT) and its analogue in Trypanosoma cruzi (TcTAT), the causative agent of Chagas disease. Moreover, TcTAT is over-expressed in strains of the parasite that are resistant to benznidazole (BZ), a drug currently used in chemotherapy. TAT has thus been indicated as a potential target for the development of new chemotherapeutic agents. In the present study, the TcTAT gene has been characterised in 14 BZ-resistant and susceptible strains and clones of T. cruzi. A unique mRNA transcript of 2.0 Kb was observed in all samples, whilst the
levels of TcTAT mRNA were very similar except for the BZ-resistant strains 17LER and BZR, which presented levels of mRNA that were 2-fold higher than their BZsusceptible counterparts. The TcTAT gene is organised in a tandem multicopy array and is located on 8 chromosomal bands that vary from 785 to 2500Kb. No amplification of TcTAT was observed in the parasite genome. A 42 KDa protein expressed by TcTAT was present in all T. cruzi samples. The results suggest that TcTAT acts as a general secondary compensatory mechanism or stress response
factor rather than as a key component of the specific primary resistance mechanism in T. cruzi.