Dissertation
Efeito do composto sulfonilhidrazônico LASSBio-1632 sobre o enfisema experimental induzido por elastase em camundongos
Registro en:
CUNHA, Leticia Candido de Lima. Efeito do composto sulfonilhidrazônico LASSBio-1632 sobre o enfisema experimental induzido por elastase em camundongos. 2019. 68 f. Dissertação (Mestrado em Biologia Celular e Molecular) - Instituto Oswaldo Cruz, Fundação Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, 2019.
Autor
Cunha, Leticia Candido de Lima
Resumen
A doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC) tem como principal manifestação o enfisema, caracterizado por colapso dos alvéolos pulmonares, decorrente de uma inflamação crônica, com produção de mediadores inflamatórios e ativação de proteases, que resultam em aumento do diâmetro alveolar e fibrose. Tem caráter degenerativo, irreversível e ainda não tem um tratamento eficaz. Nosso objetivo neste projeto foi a identificação de possíveis terapias eficazes no controle do enfisema pulmonar. Neste contexto, inibidores da enzima fosfodiesterase (PDE) 4 têm recebido especial atenção, em função da propriedade anti-inflamatória, relatada em diferentes sistemas biológicos. A partir da triagem de uma série de 13 compostos, desenhada e otimizada a partir do clássico inibidor de PDE4 rolipram, o derivado sulfonilhidrazônico LASSBio-1632 se destacou por apresentar atividade inibitória sobre as isoformas PDE4A e D, além de inibir terapeuticamente o componente inflamatório e a fibrose associados à lesão pulmonar aguda e silicose. Neste trabalho, estabelecemos o modelo de enfisema induzido por aspiração orofaríngea da elastase pancreática suína (PPE) em camundongos C57BL/6 Por meio da análise dose-resposta e da cinética da ação da PPE e tendo como parâmetros o infiltrado leucocitário no lavado broncoalveolar (BAL) e enfisema, atestado por presença de áreas de hiperinsuflação, estabelecemos a dose de 0,2 UI/animal e o tempo de 14 dias como condição para análise nos ensaios subsequentes. Verificamos que a administração terapêutica (7 - 13 dias pós PPE) dos inibidores de PDE4 de referência, cilomilaste e roflumilaste, reduziu de forma significativa o infiltrado leucocitário no BAL e o enfisema pulmonar nos animais estimulados com PPE. O tratamento com o composto LASSBio-1632 também se mostrou eficaz na inibição do infiltrado leucocitário e do enfisema tecidual. De forma importante, o composto LASSBio-1632 não apresentou atividade de indução de êmese quando comparado ao rolipram, efeito colateral comumente associado à inibidores de PDE4. Em conclusão, nossos resultados mostram que o composto LASSBio-1632 se mostrou ativo em reverter os componentes inflamatório e enfisematoso, associados à estimulação com PPE, na ausência de atividade emética. Os dados sugerem que o composto LASSBio-1632 pode ser uma estratégia farmacológica promissora para utilização futura em doenças inflamatórias pulmonares crônicas como a DPOC. Chronic obstructive pulmonary disease (COPD) has as its main feature the emphysema, which is characterized by collapse of the pulmonary alveoli, resulting from chronic inflammation, production of inflammatory mediators and activation of proteases, resulting in increased alveolar diameter and fibrosis. It is a degenerative and irreversible disease and does not yet have an effective treatment. Our aim in this study was to identify possible effective therapies for controlling the pulmonary emphysema. In this context, phosphodiesterase (PDE) 4 inhibitors have received special attention due to their anti-inflammatory property reported in different biological systems. Based on the screening of a series of 13 compounds, designed and optimized from the classic PDE4 inhibitor rolipram, the sulfonylhydrazonic derivative LASSBio-1632 was selected by its inhibitory activity on PDE4A and D isoforms, as well as therapeutically inhibiting inflammation and fibrosis associated with experimental acute lung injury and silicosis. In this study we established the model of emphysema induced by oropharyngeal aspiration of porcine pancreatic elastase (PPE), in C57BL/6 mice By dose-response and kinectics analyses of PPE action, having as parameters the leukocyte infiltration in the bronchoalveolar lavage (BAL) and emphysema (attested by the hyperinflation areas), we defined the dose of 0.2 IU/animal and day 14 our subsequent analyses. Therapeutic administration (7 - 13 days post PPE) of the reference PDE4 inhibitors, cilomilast and roflumilast, significantly reduced leukocyte infiltrate in BAL and the presence of areas of hyperinflation in the lung of PPE-stimulated animals. Treatment with the compound LASSBio-1632 was also effective in inhibiting leukocyte infiltration in BAL and tissue emphysema. Importantly, LASSBio-1632 showed no emesis-inducing activity when compared to rolipram, a side effect commonly associated with PDE4 inhibitors. In conclusion, our results show that LASSBio-1632 was active in reversing the inflammatory and emphysematous components associated with PPE stimulation in the absence of emetic activity. Taken together, they indicate that LASSBio-1632 is a promising pharmacological tool for future use in chronic pulmonary inflammatory diseases such as COPD.