Caracterização molecular e avaliação do impacto da variabilidade genética nos epítopos de células B das proteínas candidatas vacinais de Plasmodium vivax: PvCyRPA (P. vivax Cysteine-Rich Protective Antigen) e Pvs25 (P. vivax Ookinete Surface Protein)

Abstract

As infecções causadas por Plasmodium vivax representam um grande problema de saúde pública, sendo esta espécie, dentre as demais do gênero Plasmodium, considerada uma das mais difíceis de se eliminar. Por esse motivo, a pesquisa de antígenos candidatos vacinais específicos para P. vivax necessita de impulso, visto que atualmente existe apenas uma única candidata vacinal em ensaios clínicos na iniciativa global de desenvolvimento de vacinas antimaláricas. Torna-se assim fundamental a pesquisa de novos candidatos vacinais. Nesse contexto, as proteínas PvCelTOS, PvCyRPA e Pvs25 vêm sendo consideradas novas alternativas na busca de candidatos vacinais contra a malária. Embora expressas em estágios diferentes, individualmente, desempenham importantes funções durante as fases pré-eritrocítica, eritrocítica e sexuada do ciclo biológico do P. vivax. Entretanto, dada a complexidade do ciclo biológico do Plasmodium, acreditamos que uma composição antigênica ideal deveria ser direcionada a múltiplos estágios de desenvolvimento do parasito. Nesse sentido, nos propomos a identificar estas sequências de PvCelTOS (dados anteriormente publicados no final do mestrado), PvCyRPA (presente estudo – Artigo 1) e Pvs25 (presente estudo – Artigo 2) em isolados brasileiros, mapear as regiões imunogênicas conservadas e avaliar a resposta imune naturalmente adquirida de indivíduos expostos ao P. vivax, para a construção de um antígeno quimérico potencialmente vacinal contra os três estágios de desenvolvimento do parasito no hospedeiro vertebrado (esporozoítos, merozoítos e oocinetos). Destarte, identificamos e caracterizamos os genes pvcyrpa e pvs25 em 98 isolados da Amazônia Brasileira, e seus impactos na antigenicidade dos epítopos de células B. Parâmetros de diversidade genética, análise genética populacional, teste de neutralidade e rede de junção de medianas foram analisados, bem como o impacto dos polimorfismos de aminoácidos nos epítopos de células B, utilizando as ferramentas de sequenciamento genético e predição de epítopos. O gene pvcyrpa apresenta uma variação moderada, o que poderia influenciar os potenciais epítopos de células B e, consequentemente, o reconhecimento de anticorpos. Apesar das alterações de aminoácidos observadas na população e sequências estudadas em todo o mundo, os potenciais alvos de anticorpos não parecem ser significativamente afetados. Em relação ao gene pvs25, nossos dados sugerem que é um gene conservado entre os isolados brasileiros. Nossos dados apresentam uma observação importante, considerando a potencialidade desses antígenos como uma vacina candidata para cobrir distintas áreas endêmicas de P. vivax em todo o mundo