Dissertation
Triagem de compostos com potencial atividade anti-Leishmania por meio de ensaio colorimétrico semi-automatizado
Fecha
2020Registro en:
BORGES, Jadson Nascimento. Triagem de compostos com potencial atividade anti-Leishmania por meio de ensaio colorimétrico semi-automatizado. 2020. 80 f. Dissertação (Mestrado em Biotecnologia em Saúde e Medicina Investigativa)-Instituto Gonçalo Moniz, Fundação Oswaldo Cruz, Salvador, 2020.
Autor
Borges, Jadson Nascimento
Institución
Resumen
INTRODUÇÃO As leishmanioses compreendem um conjunto de doenças infecciosas causadas por parasitos do gênero Leishmania que atingem milhares de pessoas no mundo todos os anos. O tratamento convencional ainda é altamente tóxico, prolongado, financeiramente dispendioso e está associado à falha terapêutica, justificando a pesquisa e o desenvolvimento de novos medicamentos. OBJETIVO. No presente estudo foi avaliada a atividade anti-Leishmania de 46 compostos químicos a partir da aplicação de um método de análise colorimétrico. MÉTODOS. A padronização do ensaio colorimétrico semi-automatizado para medir a viabilidade dos parasitos foi realizada utilizando macrófagos J774 e a cepa BA-125 de L. amazonensis, tratando ou não com anfotericina B, seguida de incubação a 25 oC em meio Schneider e a quantificação dos promastigotas com AlamarBlue® e leitura da absorbância a 570 e 600 nm. Em seguida, avaliamos a citotoxicidade de 46 compostos (26 hidrazonas, o lapachol livre, três complexos contendo rutênio e o precursor do complexo, a mefloquina e 5 complexos contendo 4-aminoquinolina, a lausona livre e um composto com rutênio, a alizarina livre e um composto com rutênio, um complexo contendo atovaquona, três compostos tiossemicarbazonas e o ligante livre), em células de mamífero não infectadas. O potencial leishmanicida dos compostos em estudo foi avaliado no ensaio colorimétrico padronizado. RESULTADOS. Não houve diferença estatística entre os valores de IC50 encontrados pelo método da contagem manual de promastigotas e o ensaio de AlamarBlue® utilizando anfotericina (p = 0,3429). Dois compostos dos 26 testados da classe das hidrazonas (MM20 e MM24) apresentaram a atividade anti-Leishmania superior a 70% de inibição, com valores de CC50 112,3 e 120 \03BCM, IC50 23,76 e 19,56 \03BCM e IS 6,13 e 4,72, respectivamente. As tiossemicarbazonas foram os compostos menos tóxicos, porém com nenhum composto com atividade anti-Leishmania na maior concentração testada. Os complexos contendo 4-aminoquinolinas foram os mais citotóxicos (CC50 de 12,7 a 18,2 \03BCM), e três compostos (WV-65, WV-86, WV-74) tiveram maior atividade anti-Leishmania (IC50 de 3,2 a 12 \03BCM e IS de 1,72 a 8,34). CONCLUSÃO. O ensaio semiautomatizado pode ser útil para a triagem de compostos anti-Leishmania, e identificou quatro compostos mais promissores (WV-65, WV-86, WV-74 e MM20), pertencentes às 4-aminoquinolinas e hidrazonas.