Dissertação de mestrado
Novos marcadores imunofenotípicos na avaliação diagnótica de leucemia de células B precursorase neoplasias de células B maduras CD5-/CD10+ E CD5-/CD10-
Fecha
2023-07-18Autor
Chereghini, Amanda Taranto [UNIFESP]
Institución
Resumen
Introdução: a citometria de fluxo multiparamétrica tem frequente aplicação na avaliação de neoplasias linfoproliferativas, permitindo o diagnóstico, a categorização e o monitoramento da eficácia terapêutica. Entretanto, certos subtipos de neoplasias de células B maduras apresentam considerável sobreposição fenotípica, o que impõe desafios para a classificação precisa. A 9ª Conferência Internacional sobre Antígenos de Diferenciação Leucocitária Humana - HLDA9 relatou 18 novos antígenos de linhagem B. Compreender o padrão de expressão desses novos marcadores pode conceder insights valiosos para avaliação diagnóstica e classificação, além de auxiliar na identificação de fenótipos anômalos para análise de doença residual mensurável. Entretanto, informações sobre a expressão desses novos marcadores em neoplasias linfoproliferativas B permanecem escassas na literatura atual. Objetivos: o presente estudo tem como objetivo caracterizar a expressão dos novos antígenos linfoides B nos diferentes subtipos das células B em amostras não-neoplásicas, além de analisar seu papel na avaliação diagnóstica e classificação de neoplasias de células B precursoras e neoplasias de células B maduras CD5-negativo/CD10-positivo e CD5- negativo/CD10-negativo. Materiais e métodos: a expressão dos marcadores CD210a, CD270, CD215, CD307a, CD307b, CD307c, CD307d, CD354, CD355, CD357, CD358, CD351, CD352, CD353, CD360, CD361, CD362 e CD363 foi avaliada por citometria de fluxo multiparamétrica nos diferentes compartimentos de linfócitos B no sangue periférico de indivíduos saudáveis e medula óssea não-neoplásicas, e nos linfócitos clonais de pacientes com diagnóstico de neoplasias de células B. Resultados: em amostras não-neoplásicas, os linfócitos B expressaram os marcadores CD307b, CD361 e CD352 com moderada a elevada intensidade, enquanto os plasmócitos apresentaram expressão elevada dos antígenos CD352 e CD361. Na análise univariada, as subpopulações de linfócitos B normais apresentaram expressão distinta dos antígenos CD307a, CD352, CD353, CD354, CD360 e CD361. Dez antígenos apresentaram hiperexpressão na LLA-B quando comparados ao grupo controle normal. A expressão aberrante de CD307b permitiu a distinção entre células leucêmicas e células hematopoéticas normais. Em neoplasias de células B maduras CD5-negativo/CD10-positivo e CD5-negativo/CD10-negativo, foram identificados marcadores com expressões antigênicas divergentes em relação aos linfócitos B maduros normais. A análise do fenótipo de linfócitos B neoplásicos entre os distintos subtipos de neoplasias linfoproliferativas B revelou assinaturas imunofenotípicas singulares para cada subtipo, com diferenças significativas na expressão de certos antígenos entre os subtipos analisados. Conclusão: Nossos achados indicam que os novos antígenos B descritos no HLDA9 podem ser úteis na identificação de linfócitos B neoplásicos e na caracterização de fenótipos atípicos. A aplicação desses antígenos pode auxiliar na distinção entre diferentes subtipos de neoplasias linfoproliferativas B, contribuindo para aperfeiçoar a avaliação diagnóstica e o monitoramento destes casos. Introduction: Multiparametric flow cytometry is frequently used in the evaluation of
lymphoproliferative neoplasms, allowing for diagnosis, categorization, and monitoring
of therapeutic efficacy. However, certain subtypes of mature Bcell
neoplasms exhibit
considerable phenotypic overlap, posing challenges for accurate classification. The 9th
International Workshop on Human Leukocyte Differentiation Antigens HLDA9
reported 18 new Blineage
antigens. Understanding the expression pattern of these
new markers can provide valuable insights for diagnostic evaluation and classification,
as well as aid in identifying anomalous phenotypes for measurable residual disease
analysis. However, information regarding the expression of these new markers in Bcell
lymphoproliferative neoplasms remains scarce in the current literature.
Objectives: The present study aims to characterize the expression of the new B
lymphoid antigens in different subtypes of B cells in nonneoplastic
samples, as well
as analyze their role in the diagnostic evaluation and classification of precursor Bcell
neoplasms and CD5negative/
CD10positive
and CD5negative/
CD10negative
mature Bcell
neoplasms. Materials and Methods: The expression of CD210a,
CD270, CD215, CD307a, CD307b, CD307c, CD307d, CD354, CD355, CD357,
CD358, CD351, CD352, CD353, CD360, CD361, CD362, and CD363 markers was
evaluated by multiparametric flow cytometry in different compartments of B
lymphocytes in the peripheral blood of healthy individuals and nonneoplastic
bone
marrow, as well as in clonal lymphocytes from patients diagnosed with Bcell
neoplasms. Results: In nonneoplastic
samples, B lymphocytes expressed CD307b,
CD361, and CD352 markers with moderate to high intensity, while plasma cells
showed high expression of CD352 and CD361 antigens. In univariate analysis, normal
Bcell
subpopulations exhibited distinct expression of CD307a, CD352, CD353,
CD354, CD360, and CD361 antigens. Ten antigens showed overexpression in BALL
compared to the normal control group. The aberrant expression of CD307b allowed for
the distinction between leukemic cells and normal hematopoietic cells. In CD5negative/
CD10positive
and CD5negative/
CD10negative
mature Bcell
neoplasms,
markers with divergent antigenic expressions compared to normal mature B
lymphocytes were identified. Analysis of the phenotypes of neoplastic B lymphocytes among different subtypes of Bcell
lymphoproliferative neoplasms revealed unique
immunophenotypic signatures for each subtype, with significant differences in the
expression of certain antigens among the analyzed subtypes. Conclusion: Our
findings indicate that the new B antigens described in HLDA9 may be useful in
identifying neoplastic B lymphocytes and characterizing atypical phenotypes. The
application of these antigens can aid in distinguishing between different subtypes of Bcell
lymphoproliferative neoplasms, contributing to improving the diagnostic evaluation
and monitoring of these cases.